轻便型集菌仪的操作流程需严格遵循无菌操作原则，核心围绕 “仪器准备→样品处理→过滤截留→培养观察” 展开，具体步骤适配无菌检查或微生物限度检查需求，细节如下：
一、操作前准备
环境与器具准备
操作需在洁净区(如百级超净台)或无菌环境中进行，提前 30 分钟开启超净台及紫外消毒灯，对操作台面、器具消毒;
准备配套的一次性集菌培养器(含滤膜，孔径 0.45μm 或 0.22μm，根据检测需求选择)、无菌注射器 / 移液管、稀释液(无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液)、培养基(硫乙醇酸盐流体培养基用于需氧 / 厌氧菌，改良马丁培养基用于真菌)。
仪器检查与调试
检查轻便型集菌仪外观，确认电源、蠕动泵头无破损，锂电池电量充足(或接通电源);
开启仪器，设置参数：转速(一般调节为 80~120rpm，根据样品黏度调整)、运行模式(定时或连续运行)，空载试运行 1~2 分钟，确认泵头转动平稳、无异常噪音。
集菌培养器安装
拆开一次性集菌培养器包装，无菌操作下将培养器进样口与样品管路连接，出液口连接排液管(排液管末端置于无菌废液桶);
将培养器卡入集菌仪的蠕动泵头卡槽，确保管路贴合泵头滚轮(避免管路扭曲或漏气)，轻轻压紧泵头压盖。
二、样品过滤与截留
样品处理
液体样品(如注射剂、纯化水)：若样品为无菌制剂，直接取规定体积(如 100mL)通过无菌注射器注入集菌培养器进样口;若样品含抑菌成分，需加入适量中和剂(如 β- 内酰胺酶中和青霉素类)，或采用薄膜过滤法反复冲洗滤膜(用 300~500mL 稀释液冲洗)。
固体样品(如食品、中药材)：取样品适量，加入无菌稀释液制成匀浆，经无菌滤膜(粗滤)去除大颗粒杂质后，取滤液注入集菌培养器。
启动过滤
按下仪器 “启动” 键，蠕动泵运转带动样品通过滤膜，微生物被截留于滤膜表面;
过滤过程中观察流速，若流速过慢(如样品黏度高)，可适当提高转速(不超过 150rpm)，避免滤膜堵塞;若出现漏液，立即停机，检查管路连接是否紧密。
滤膜冲洗(按需)
对于含抑菌成分的样品，过滤完成后，用无菌稀释液分 3~5 次冲洗滤膜(每次 50~100mL)，充分洗脱抑菌物质，避免影响后续微生物生长。
三、培养基添加与培养
培养基注入
过滤及冲洗完成后，关闭集菌仪，无菌操作下向集菌培养器中注入融化并冷却至 45~50℃的培养基(硫乙醇酸盐流体培养基约 100mL，或改良马丁培养基约 80mL);
轻轻摇晃培养器，使培养基均匀覆盖滤膜，确保无气泡残留(气泡会遮挡微生物生长)。
培养观察
将集菌培养器从仪器上取下，密封培养器端口，置于对应温度的培养箱中：需氧 / 厌氧菌培养温度 30~35℃，培养时间 5 天;真菌培养温度 20~25℃，培养时间 7 天;
培养期间每日观察培养基是否浑浊(或有无菌落生长)，若出现浑浊，取培养液涂片镜检，或转种至固体培养基鉴定微生物种类。
四、操作后清理
仪器清洁
关闭仪器电源，拆卸集菌培养器(按医疗废物处理)，用 75% 酒精擦拭蠕动泵头、卡槽及仪器表面，去除残留液体或污染物;
若管路有残留样品，用无菌水冲洗泵头内部，晾干后盖上防尘罩。
记录与结果判定
详细记录样品信息、仪器参数、过滤体积、培养条件及观察结果;
若培养基澄清无浑浊，判定为 “无菌检查合格”;若出现浑浊或菌落生长，需进一步确认是否为样品污染(排除操作污染后，判定为不合格)。
五、关键注意事项
全程严格无菌操作，避免环境、器具引入杂菌导致假阳性;
集菌培养器需一次性使用，禁止重复利用;
不同样品(如油性制剂、高盐样品)需选择适配的滤膜材质(如疏水性滤膜适配油性样品)，避免滤膜溶解或堵塞。
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