一、技术概述
小麦胚芽凝集素是一种来源于小麦胚芽的蛋白质，属于凝集素家族。其能够特异性识别并结合N-乙酰氨基葡萄糖及其衍生物。此类糖基结构广泛存在于多种复合糖与糖缀合物中。因此，WGA成为一种用于探测和研究特定糖结构的常用工具。
辣根过氧化物酶是一种广泛应用的酶，其能催化过氧化氢对特定底物的氧化反应，产生可检测的信号，如显色反应或化学发光。将HRP与WGA通过共价耦联，所得的HRP-WGA复合物兼具WGA的特异性结合能力与HRP的信号生成能力。
二、试剂详细信息
中文名称：辣根过氧化物酶标记WGA，辣根过氧化物酶标记的小麦胚芽凝集素
英文名称：HRP WGA，Horseradish Peroxidase WGA，HRP Wheat Germ Agglutinin，Horseradish Peroxidase Wheat Germ Agglutinin
货号：Y-R-4449
规格：5mg，10mg，25mg（可定制）
纯度：≥95%
溶解性：溶于部分有机溶液。
保存条件：-20℃以下储存、干燥、避光。
注意事项：根据使用要求进行分装，避免反复冻融。
三、主要应用领域
组织与细胞化学分析：在经适当固定的组织切片或细胞涂片上，HRP-WGA可用于标记细胞膜或细胞内特定细胞器上的糖复合物，从而观察其分布与丰度。
糖蛋白检测与分析：在电泳后印迹膜上，HRP-WGA可作为探针，检测含有相应糖基的糖蛋白条带，辅助进行糖蛋白组学研究。
特定细胞或结构的标记与分离：基于某些细胞类型表面特定的糖表达谱，HRP-WGA可用于对其进行标记，辅助进行显微观察或与其他技术联用进行富集。
四、 技术优势要点
特异性：WGA对特定单糖结构的识别提供了结合特异性，减少了非特异性标记。
信号放大效应：酶促反应具有催化放大作用，理论上一个酶分子可催化产生大量信号分子，从而提高了检测的灵敏度。
信号稳定性：显色反应产生的沉淀物颜色稳定，便于长期保存与观察。
兼容性：HRP显色体系成熟，可与多种常规显微镜观察技术及后续分析流程兼容。其检测方法与常规免疫组化或免疫印迹中的HRP显色步骤相似。

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五、实验设计考量
使用HRP-WGA时，需注意以下关键参数：
样品制备：固定方法需能保存目标糖结构的完整性，同时保持其可及性。避免使用可能破坏糖结构或导致其丢失的步骤。
结合缓冲液：适当的缓冲液离子强度与pH值对于维持WGA的最佳结合活性至关重要，通常需含有特定离子以支持结合。
浓度与孵育时间：需通过预实验优化试剂的工作浓度及孵育时间，以平衡信号强度与背景噪音。
对照设置：建议设置包括阳性对照、阴性对照（如使用游离的N-乙酰氨基葡萄糖进行竞争抑制）以及省略一抗的对照（在多重标记中），以验证信号的特异性。
检测系统：根据实验目的（定性定位或半定量）和仪器配置，选择合适的HRP底物（显色或化学发光）。
六、相关试剂推荐
Congo Red-Biotin
Did（红色细胞膜荧光探针）
127274-91-3
(E)-1-Ethyl-2-((1-ethylquinolin-2(1H)-ylide ne)methyl)quinolin-1-ium iodide
63902-24-9
Psoralen MOP Succinimidyl Ester，Psoralen MOP SE
5'-DMT-dU Amidite，5'-DMT-deoxyUridine
Amino Modifier TEG mdC Amidite，5'-DMT-mdC(TEG-Amino-TFA)
5'-Aminooxy-Modifier-6-CE Phosphoramidite，133975-85-6
133975-85-6
3,3'-Dipropylthiacarbocyanine iodide
53336-12-2
Phalloidin, CF568；CF568鬼笔环肽偶联物
CF405L WGA；CF405L标记小麦胚芽凝集素
Quasar 670 Amidite；Quasar 670 亚磷酰胺
OG488-Dextran，Oregon Green488-Dextran
DMABA NHS ester，DMABA N-Hydroxysuccinimide Ester
58068-85-2
AMCA C2 Maleimide，AMCA-Maleimide
温馨提示：产品仅用于科学研究
本文编辑来源于：WWH。