摘要：当下的季节性流感疫苗对变异、大流行毒株防护效果有限，每年都需重新调配。科研人员将研发重心从易变异的血凝素头部转向病毒保守结构，借助结构设计、纳米颗粒展示等技术优化抗原，同时尝试提高抗原剂量、搭配新型佐剂等策略。目前多款新一代疫苗候选者已进入人体试验，不过临床研发、监管审批仍有诸多难题待解，通用流感疫苗的实现还需多方协作。
一、现有流感疫苗，短板真的很明显
每年秋冬，打流感疫苗成了很多人的常规操作。但季节性流感疫苗的保护效果，其实年年波动（图1a），核心原因是流感病毒总在通过基因突变发生抗原漂移，疫苗毒株和流行毒株难做到百分百匹配。
图1a2009-2019年季节性流感疫苗有效性变化
不只是漂移，近百年里1918、2009等多次流感大流行，都是新型病毒株引发的。当下的疫苗主要诱导针对血凝素（HA）头部的免疫反应，这个区域变异快，对异源毒株基本没防护力。老人、儿童这类人群，还会因自身免疫状态，成为流感并发症的高发群体。
目前获批的流感疫苗分灭活、减毒活疫苗两类，多数是鸡胚培养的裂解或亚单位疫苗（表1），重组蛋白疫苗虽有应用，但成本偏高。鸡胚培养不仅依赖蛋源，还可能让病毒HA发生突变，影响后续的免疫效果，这也是现有疫苗生产的一大痛点。
表1美国和欧洲目前获批的流感疫苗
二、通用疫苗，科研人员的终极目标
研发通用流感疫苗，是整个领域的核心方向。简单说，就是让疫苗能跨毒株、跨亚型防护，还能实现长效保护，不用年年接种。从现有疫苗的株特异性防护，到真正的通用防护，其实是一步步进阶的过程（图1c）。
流感A的HA有18个亚型，分1、2两个进化群，流感B则有维多利亚和山形两个谱系（图1b），当下疫苗仅覆盖少数毒株。
科研人员的思路，是先把防护范围拓展到同亚型、同群的不同毒株，再逐步实现对所有流感A、甚至A+B的全覆盖。现在已经有一些尝试落地，比如高剂量四价灭活疫苗，对老年人的防护效果比标准剂量更好，就是通过提升抗原剂量实现的优化。
还有COBRA这类计算优化的广谱抗原，以及嵌合HA抗原，在动物实验里能诱导出跨亚型的抗体反应。这些尝试虽还没到通用的程度，但都在为广谱防护铺路，让疫苗不再只盯着单一流行毒株。
三、瞄准病毒保守区，找对研发新靶点
既然HA头部易变异，科研人员就把目光投向了病毒的保守结构，这是下一代疫苗的核心研发思路。HA的茎区是重中之重，这个区域变异率低，还能诱导广谱中和抗体，比如CR6261这类抗体，能结合HA茎区阻止病毒膜融合，实现跨亚型防护。
为了让疫苗专门诱导茎区的免疫反应，科研人员设计了“无头”HA免疫原，要么把HA茎区融合在铁蛋白纳米颗粒上，要么构建三聚体迷你HA（图2b）。这些免疫原在动物实验里能诱导出异源亚型的保护力，目前已有一款进入I期临床（表2），算是很有潜力的候选者。
图2b靶向HA保守茎区的新型免疫原结构模型
除了HA茎区，神经氨酸酶（NA）也成了新靶点。研究发现NA抑制活性比血凝抑制（HAI）滴度，更能预测对流感的防护力，而且NA的抗原漂移和HA独立，部分NA抗体还能实现广谱防护。只是当下疫苗并未标准化NA的含量，后续补充标准化NA，或能直接提升疫苗效果。
另外，M2胞外域（M2e）、核蛋白（NP）这类保守蛋白也被盯上。M2e虽免疫原性弱，但偶联载体后能诱导Fc介导的保护；NP则能激活交叉反应性T细胞，辅助提升防护的广谱性，多款靶向这些蛋白的疫苗也已进入临床阶段（表2）。
表2临床研发中的流感疫苗平台
四、疫苗设计，这些技术手段在发力
想让新靶点发挥作用，疫苗的设计和递送方式也得升级。纳米颗粒展示是很亮眼的技术，比如铁蛋白纳米颗粒能让HA保持天然三聚体构象，还能提高抗原价数，更好地激活B细胞受体，在动物实验里显著提升了抗体反应和异源防护力。
核酸疫苗和病毒载体疫苗也成了研发热门。Moderna的mRNA疫苗能诱导HA茎区抗体，腺病毒、牛痘病毒MVA等载体，能表达HA、NP等抗原，还能实现初免-加强的免疫策略，在临床中能同时激活体液和细胞免疫，比传统灭活疫苗的免疫效果更全面。
佐剂的搭配也在优化。MF59、AS03这类油包水佐剂，能显著提升老年人的抗体反应，还能拓宽防护的毒株范围；TLR激动剂、皂苷类新型佐剂，在动物实验里也展现出良好的免疫增强效果，只是部分佐剂还需解决安全性和生产一致性的问题。
还有病毒样颗粒（VLP）疫苗，不含病毒核酸但保留病毒结构，能诱导黏膜免疫和系统免疫，多款VLP疫苗在临床中表现出长效的交叉反应性HAI反应，也是下一代疫苗的重要方向。
五、临床研发，这些坎儿还得跨过去
新一代流感疫苗的临床研发，比传统疫苗难得多。首先是免疫保护相关指标的问题，传统疫苗用HAI滴度作为保护的替代指标，但新一代疫苗靶向HA茎区等位点，不会诱导HAI反应，缺少公认的替代指标，只能靠大规模现场试验验证效果，耗时又耗力。
安慰剂对照试验也很难开展，毕竟季节性流感疫苗已广泛推荐接种，伦理上不允许设置空白对照。只能让受试者同时接种试验疫苗和传统疫苗，评估在毒株错配时的防护提升，这让试验设计变得复杂，还可能出现免疫相互作用的问题。
监管审批也有挑战，传统疫苗能通过加速审批获批，新一代疫苗因缺少替代指标，大概率需要完成确证性临床试验。即便获批，也会有严格的上市后监测要求，比如通过疫苗安全数据链、PRISM项目收集真实世界的安全和效果数据。
六、未来展望，机遇与挑战并存
坦白讲，当下流感疫苗的生产体系，四十多年来基本没大的变化，鸡胚培养仍是主流，虽能满足全球基础需求，但产能和灵活性都有限。细胞培养、重组蛋白生产技术虽已获批，只是成本偏高，后续随着高密度细胞培养技术的发展，产能和成本问题或许能逐步解决。
结构生物学、免疫学的进步，让我们对流感病毒的抗原结构、免疫机制理解越来越深，多款新一代疫苗候选者进入临床，这是实实在在的进步。但通用流感疫苗的实现，从来不是单一实验室能完成的事，需要资助机构、科研人员、药企、监管部门的多方协作。
从年年打疫苗到一次接种实现多年广谱防护，这条路还有不少难题要解。但至少现在，科研人员已经找对了方向，瞄准了病毒的“软肋”，也开发出了一系列有潜力的技术和候选疫苗。我更愿意相信，随着研究的深入，通用流感疫苗的实现，只是时间问题。
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