上皮性卵巢癌（Epithelial Ovarian Cancer, EOC）是女性生殖系统发病较为隐匿的致命杀手，绝大部分患者确诊时已属晚期，高级别浆液性卵巢癌（High-grade serous ovarian cancer，HGSOC）是其最常见的病理类型。HGSOC标准治疗方案是手术结合含铂药物化疗、联合PARP抑制剂为主的维持治疗，然而，铂耐药是导致HGSOC患者预后较差的罪魁祸首。恶性腹水作为晚期HGSOC的典型特征，不仅是肿瘤转移的温床，更潜伏着介导细胞通讯调控耐药微环境的关键分子。
近日，中国科学技术大学附属第一医院周颖主任医师、彭程主任医师联合中国科学技术大学生命科学与医学部陈亮研究员、单革教授团队在Advanced Science杂志在线发表题为Ascites circRNA ASCOR Drives Platinum Resistance of High-Grade Serous Ovarian Cancer by Facilitating RPA1 Nuclear Translocation的研究论文，揭示了腹水细胞外囊泡来源的环形RNA ASCOR通过核孔复合体蛋白NUP153呈递RPA1蛋白入核，继而通过在细胞核内招募更多的解旋酶DDX18抑制R-loop形成，并最终激活PI3K-Akt通路促进HGSOC铂耐药的分子机制。
该研究以HGSOC腹水中的小细胞外囊泡（small extracellular vesicles，sEVs）这一重要微环境介质为关键切入点，通过送检铂敏感与铂耐药患者sEVs样本行高通量测序并结合临床肿瘤组织样本分析，鉴定出环形RNA ASCOR（Ascites‑derived Small extracellular vesicle CircRNA related to Ovarian cancer platinum Resistance）在铂耐药患者腹水sEVs中显著上调。临床相关性分析显示，ASCOR在腹水sEVs及配对肿瘤组织中均呈高表达，且其高表达与患者较短的无进展生存期显著相关，提示ASCOR可能作为潜在的不良预后标志物。在细胞和动物模型层面，ASCOR过表达可显著增强卵巢癌细胞对顺铂的耐受性，表现为细胞活力和增殖能力增加、凋亡水平降低及DNA损伤减轻，上述促耐药效应不仅存在于ASCOR过表达细胞中，还可通过sEVs介导的细胞间转运传递至受体细胞。动物实验进一步证实，无论是ASCOR过表达细胞来源的sEVs，还是高ASCOR表达患者腹水来源的sEVs，均可在顺铂处理条件下显著促进肿瘤生长并降低DNA损伤水平，进一步证实ASCOR是促进卵巢癌铂耐药的重要因子。
机制上，研究者发现ASCOR不具备编码多肽潜能，也不通过miRNA海绵机制发挥作用。进一步的RNA pulldown-MS联合数据库辅助的结合位点验证实验证实复制蛋白A1（RPA1）的66-127aa与ASCOR的213-264nt位点相互作用。相互调控关系验证、免疫荧光及核质分离等实验表明，ASCOR在核孔复合体蛋白NUP153帮助下促进RPA1蛋白核转位（nuclear translocation）。进一步分别在细胞质和细胞核成分的co-IP证实，核内RPA1通过招募解旋酶家族成员DDX18进而抑制DNA:RNA三链结构R-loop的异常积累、减轻DNA损伤并维持基因组稳定性，最终促进卵巢癌铂耐药。为进一步揭示ASCOR-RPA1-DDX18信号轴调控卵巢癌铂类耐药的下游信号网络，研究人员通过一系列的RNA-seq和snRNA-seq均证实PI3K/Akt信号通路显著激活，通过敲低DDX18或抑制PI3K/Akt信号可有效逆转ASCOR介导的耐药表型。在转化层面，靶向ASCOR反向剪接（back-splicing）位点设计的反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide，ASO）在腹腔荷瘤小鼠模型中可显著增强顺铂治疗效果，抑制肿瘤生长并显著增加DNA损伤，显示出良好的转化治疗价值。
此项工作不仅清晰阐明了腹水sEVs中ASCOR可作为呈递介质与核孔复合体相关蛋白互作介导RPA1蛋白核转位促进铂耐药的新机制，还揭示了RPA1在细胞核中通过招募DDX18抑制R-loop生成以维持基因组稳定性的这一非经典机制；更重要的是，本研究开发的靶向ASCOR ASO在腹腔荷瘤模型中显著增强了顺铂疗效，为HGSOC的临床提供了潜在的靶向治疗新策略。
中国科学技术大学附属第一医院妇产科刘瀚元医师/助理研究员和朱晨辰医师为该研究的共同第一作者，中国科学技术大学附属第一医院周颖主任医师、彭程主任医师，中国科学技术大学生命科学与医学部陈亮研究员和单革教授为共同通讯作者。
原文链接：https://advanced.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202518922
制版人：十一
BioArt
Med
Plants
人才招聘
学术合作组织
（*排名不分先后）
转载须知
【非原创文章】本文著作权归文章作者所有，欢迎个人转发分享，未经作者的允许禁止转载，作者拥有所有法定权利，违者必究。
热门跟贴