RB-Cytochrome C(罗丹明标记细胞色素C)是一种将荧光染料罗丹明(Rhodamine)与细胞色素C(Cytochrome C)蛋白质通过共价键结合形成的荧光标记分子,在细胞生物学和生物医学研究中具有广泛应用。
一、组成与特性
罗丹明(Rhodamine)
- 荧光特性:红色荧光染料,激发波长约为550-570 nm,发射波长约为580-610 nm。
- 优势:高荧光量子产率、优良的光稳定性,适合长时间荧光成像。
细胞色素C(Cytochrome C)
- 功能:线粒体呼吸链中的关键蛋白质,参与电子传递和能量代谢;在细胞凋亡过程中释放到细胞质中,触发凋亡级联反应。
结合方式
- 罗丹明通过共价键(如酰胺键)与细胞色素C的氨基或其他反应性基团结合,形成稳定的荧光标记复合物。
结构式:
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二、实验操作要点
标记方法
- 直接标记:罗丹明染料与细胞色素C直接反应,形成共价结合。
- 间接标记:通过中间分子(如异硫氰酸酯)活化罗丹明,再与细胞色素C反应,提高标记效率。
纯化步骤
- 透析、离心或HPLC去除未反应的罗丹明和其他杂质,确保标记复合物纯度。
荧光检测
- 使用荧光显微镜、流式细胞仪或荧光光谱仪,选择适当的滤光片检测罗丹明的红色荧光信号。
储存条件
- 温度:-20℃避光保存,防止荧光降解。
- 稳定性:避免反复冻融,保持干燥、避光、避氧环境。
三、特点
- 高灵敏度:罗丹明的强荧光信号支持低浓度检测。
- 生物兼容性:细胞色素C为天然蛋白,标记后保留生物活性,减少对细胞功能的干扰。
- 多模态应用:适用于荧光成像、流式细胞术、光谱分析等多种技术。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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