传统癫痫药物筛选依赖动物模型,通量低、成本高。爱思益普整合高通量筛选技术,建立了从体外初筛到体内验证的快速发现体系,显著提高筛选效率。
体外高通量筛选是快速发现的关键。平台采用FLIPR荧光检测系统,在96/384孔板中同步检测数千个化合物对离子通道或受体的活性。针对KCNQ2/3通道,采用铊离子通量检测;针对GABA_A受体,采用氯离子敏感荧光蛋白检测;针对谷氨酸受体,采用钙敏感荧光染料检测。这种高通量初筛,每日可处理数千个数据点,快速锁定苗头化合物。
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细胞水平表型筛选评估功能活性。平台建立了原代神经元癫痫样放电模型:通过无镁培养液或GABA受体拮抗剂,诱导神经元产生同步化放电,模拟癫痫的神经网络活动。采用多电极阵列(MEA)记录,实时监测放电频率、同步化程度、爆发间隔等参数,评估化合物的抑制作用。这种表型筛选保留了细胞网络的复杂性,提高了临床预测价值。
斑马鱼癫痫模型实现中通量体内筛选。斑马鱼具有繁殖快、通量高、遗传背景清晰的优势。平台采用戊四唑或电刺激诱导斑马鱼幼体癫痫样行为,通过自动化行为分析系统,定量评估化合物的抗癫痫效应。这种模型兼具体外通量与体内相关性,适用于大规模化合物库的快速筛选。
筛选数据整合指导结构优化。平台将高通量筛选数据与分子对接、QSAR模型整合,建立结构-活性关系(SAR),指导药物化学家进行结构优化。通过迭代筛选-优化循环,快速获得活性强、选择性高、成药性好的候选分子,显著缩短研发周期
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