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（来源：抗体圈）
摘要：传统 CAR-T 疗法需要从患者体内抽血，在实验室里改造 T 细胞再回输，动辄百万的费用和复杂的制造流程让很多患者望而却步。今天给大家分享一篇刚发表在《自然・通讯》上的重磅研究，Broad 研究所的团队开发出了TaSEL 技术，能直接在患者体内生成功能性 CAR-T 细胞。他们用骆驼纳米抗体解决了靶向效率问题，用海豚麻疹病毒嵌合包膜逃避了人体预存免疫，在淋巴瘤小鼠模型中取得了和传统 CAR-T 相当甚至更好的疗效。这可能是 CAR-T 疗法走向 "一针化" 和 "平民化" 的关键一步。
为什么我们急需体内 CAR-T？
其实 CAR-T 疗法治疗血液癌的效果真的没话说，很多晚期患者都能实现完全缓解。但它有个致命缺点 ——个体化制造。
每个患者都要抽自己的血，送到专门的 GMP 车间培养改造，整个过程需要 2-3 周。不仅耗时，成本更是高得吓人，动辄几十万上百万。我身边就有患者因为凑不齐治疗费，眼睁睁错过了最佳治疗时机。
而且体外长期培养的 T 细胞，功能和持久性都会大打折扣。如果能直接在患者体内改造 T 细胞，那这些问题就都迎刃而解了。
两个关键突破，解决行业痛点
之前的体内 CAR-T 尝试一直不成功，主要卡在两个地方：靶向效率低和免疫原性高。这篇论文正好完美解决了这两个问题。
突破一：骆驼纳米抗体比传统抗体好用 10 倍
科学家们之前一直用单链可变片段 (scFv) 作为慢病毒的靶向结构域。但 scFv 很容易聚集，导致病毒表面表达量低，转导效率差。
这次研究团队换了个思路，用骆驼来源的纳米抗体 (VHH) 代替 scFv。纳米抗体只有传统抗体的 1/15 大小，没有轻链，不会发生错配和聚集。
结果太惊艳了！纳米抗体融合蛋白在病毒表面的表达量和野生型差不多，转导效率直接提升了好几个数量级。而且特异性非常好，只感染目标 T 细胞，不碰其他细胞。
突破二：海豚病毒帮我们躲过人体免疫系统
另一个大问题是麻疹预存免疫。全球 90% 以上的人都接种过麻疹疫苗，体内有大量抗麻疹病毒的抗体。之前用麻疹病毒包膜的慢病毒，一进入人体就被抗体中和了，根本发挥不了作用。
研究团队测试了多种麻疹病毒家族的成员，发现海豚麻疹病毒 (DMV) 和人类麻疹病毒的序列相似度最低，几乎不会被人类的麻疹抗体识别。
不过纯 DMV 包膜的功能有点弱，他们又做了个巧妙的设计：把 DMV 的胞外区和麻疹病毒的胞内区融合，做成了嵌合包膜蛋白。这样既保留了免疫逃避能力，又有和麻疹病毒一样的融合活性。
测试结果显示，即使在高滴度麻疹抗体的血清中，这种嵌合慢病毒的转导效率也几乎不受影响，和常用的 VSV-G 包膜差不多。
TaSEL 技术到底有多厉害？
有了这两个突破，研究团队打造出了最终的靶向刺激工程慢病毒 (TaSEL)。他们还在病毒表面加了CD3 和 CD80，这样病毒一接触 T 细胞就能激活它，解决了静息 T 细胞难转导的问题。
先看体外实验。把 TaSEL 和未激活的人 T 细胞、CD19 阳性的淋巴瘤细胞混在一起，不用任何额外刺激。
结果太震撼了！第 3 天就能看到明显的肿瘤细胞杀伤，第 6 天所有肿瘤细胞都被消灭了。而对照组用 VSV-G 包膜的慢病毒，反而把 CAR 基因转到了肿瘤细胞上，一点杀伤效果都没有。
再看体内实验。研究人员给免疫缺陷小鼠接种了淋巴瘤细胞，然后注射人 T 细胞和 TaSEL。
结果显示，TaSEL 能高效地在小鼠体内生成 CAR-T 细胞，而且特异性极高。在血液、骨髓和脾脏中，几乎所有的 CAR 阳性细胞都是 T 细胞，没有检测到明显的脱靶现象。
更重要的是，体内生成的 CAR-T 细胞疗效比传统体外培养的还要好。传统 CAR-T 组的小鼠没有一只活过 30 天，而 TaSEL 组有 2/3 的小鼠实现了长期肿瘤控制。
思考和展望
说实话，看完这篇论文我真的很兴奋。这可能是 CAR-T 疗法诞生以来最具革命性的突破之一。
如果 TaSEL 技术能成功转化到临床，那 CAR-T 疗法的成本可能会降到原来的 1/10 甚至更低。患者不用再等 2-3 周，当天就能接受治疗。而且体内生成的 T 细胞功能更好，持久性更强，疗效可能会更上一层楼。
当然，现在还只是小鼠实验，离临床应用还有一段距离。比如病毒的生产滴度还比较低，需要进一步优化。还有长期安全性问题，比如会不会插入突变，会不会引起自身免疫反应等等。
但我相信，随着技术的不断完善，"一针治愈癌症" 的梦想离我们越来越近了。建议大家持续关注这个领域，未来几年一定会有更多好消息传来。
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