罗丹明-L-半胱氨酸(Rhodamine B-L-Cysteine / RB-L-Cys)
一、基本信息
中文名称:罗丹明标记L-半胱氨酸、罗丹明B-L-半胱氨酸
英文名称:Rhodamine B-L-Cysteine、RB-L-Cysteine、RB-Cys、Cys-RB、L-Cysteine-Rhodamine B conjugate
组成:罗丹明B(Rhodamine B)荧光基团与L-半胱氨酸(L-Cysteine)的巯基/氨基通过共价键偶联而成
外观:橙红色至深红色粉末
纯度:通常 ≥95%
规格:常见 1 mg、5 mg、10 mg
用途:仅供科研使用,不可用于人体实验
二、荧光特性
激发波长约 550 nm,发射波长约 575–590 nm,呈明亮的橙红色荧光。罗丹明B属于氧杂蒽类染料,具有高量子产率(约0.79)、强吸收系数,荧光信号明亮且信噪比优良。光稳定性好,pH 5.0–9.0范围内荧光强度波动小于10%,温度25–40℃对荧光稳定性几乎无影响,适合复杂生物体系检测。需严格避光保存,长时间强光照射会导致荧光淬灭。
三、结构与制备
罗丹明B经NHS活化后,与L-半胱氨酸的氨基或巯基在弱碱性条件(pH 7.0–8.5)下反应,形成稳定的酰胺键或硫醚键。制备流程:活化罗丹明B→与L-半胱氨酸反应→透析或GPC去除游离染料→HPLC纯化→质谱和荧光光谱表征。控制投料比约1:1,标记后L-半胱氨酸的生理活性可保留80%以上。
四、主要应用
生物成像:荧光显微镜下追踪L-半胱氨酸在细胞内的分布和动态变化,可定位至线粒体、内质网等。
氧化还原研究:监测谷胱甘肽合成、巯基氧化还原平衡等代谢过程。
生物传感:L-半胱氨酸的巯基可与Cu²⁺、Zn²⁺、Hg²⁺等金属离子特异性结合,荧光信号发生变化,可用于金属离子检测。
药物筛选:通过荧光信号变化评估药物与靶标的相互作用。
五、溶解性与使用条件
水溶性约15–25 mg/mL(pH 6.0–7.0最佳),易溶于DMSO、DMF等有机溶剂。溶解后需现配现用,避免长时间放置导致聚集。最适pH 6.5–7.5,最适温度37℃。巯基易被氧化,需避免接触氧化剂和金属离子,EDTA可缓解抑制效应。建议用PBS+0.1% BSA稀释,并做滴定确定最适用量。
六、储存与注意事项
-20℃以下冷冻保存,严格避光、防潮、密封。避免反复冻融。取用时从冰箱取出缓慢升至室温,取用后充入氮气封口放回冰箱。佩戴手套和护目镜操作,废弃物按规范处置。仅限科研。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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