产品名称:二苯并环辛炔 - 探针,DBCO-Probe的理化质控与储存稳定特性
一、基础分子结构分类与组成
DBCO-Probe 泛指末端共价修饰二苯并环辛炔(DBCO)的各类功能探针,无统一 CAS 号,通用三段式结构:DBCO 环辛炔反应头、柔性连接间隔臂、信号 / 功能探针单元,依靠酰胺键稳定相连,整体分为荧光探针、生物素探针、药物探针、质谱标记探针四大主流品类。
DBCO 活性反应单元:二苯并环辛炔为八元环张力炔烃,苯环共轭结构提升环张力,无需铜离子催化即可与叠氮基团(N₃)发生 SPAAC 无铜点击反应;无重金属毒性,不会损伤活细胞、敏感蛋白、核酸,是生物正交标记核心基团。
间隔连接臂:多采用短链烷基、PEG、烷基酰胺结构,拉开 DBCO 环与探针信号基团距离,消除空间位阻,提升偶联效率;PEG 型间隔臂同步提升探针水溶性,降低非特异性吸附。
功能探针单元:根据实验需求搭配不同功能模块,常见包括 AF488、Cy3、Cy5、AMCA 等荧光染料、生物素、质谱标记小分子、细胞毒性药物、核磁造影配体,决定探针检测与应用方向。
二、DBCO 核心反应机理与正交优势
DBCO 与叠氮修饰生物分子发生环加成,生成稳定五元三唑环状共价键,反应条件温和,室温中性 PBS 缓冲液即可完成,不与氨基、巯基、羧基等细胞内源基团发生副反应。
相较于铜催化 CuAAC 炔基探针,DBCO-Probe 最大优势为无铜离子,避免铜离子造成蛋白氧化、细胞凋亡、荧光淬灭,适配活细胞示踪、活体组织原位标记;反应产物化学稳定性强,酸碱、还原剂环境下不易断裂,可耐受细胞裂解、蛋白纯化、免疫染色多步操作。
三、理化质控与储存稳定特性
不同型号 DBCO-Probe 性状存在差异:荧光类多为粉末,溶于 DMSO、DMF、甲醇,水相可稀释使用;生物素 DBCO 探针水溶性更佳。通用质控标准:HPLC 纯度≥95%,高端活细胞成像级≥98%;DBCO 官能度≥90%,游离染料、未反应 DBCO 小分子杂质<2%;内毒素≤0.1 EU/mg,满足细胞与动物实验。
储存要求:-20℃避光、干燥密封保存,充氩隔绝氧气,有效期 12 个月;DBCO 环辛炔遇强光、高温易缓慢降解;水溶液现配现用,4℃存放不超过 3 天,缓冲液禁止添加叠氮化钠、强还原剂。
四、主流细分探针类型与对应功能
DBCO 荧光探针(DBCO-Cy5、DBCO-AF488 等):用于叠氮修饰蛋白、脂质、多糖、细胞表面分子荧光成像,实现多色共定位、活细胞动态追踪、组织切片原位标记;
DBCO-Biotin 生物素探针:标记叠氮修饰靶分子,后续通过链霉亲和素实现信号放大,适配 FISH、蛋白印迹、低丰度蛋白富集;
DBCO - 药物探针:偶联化疗小分子,靶向标记叠氮修饰抗体、多肽,构建无铜点击化学前药,用于肿瘤靶向递送;
DBCO 质谱探针:携带特征同位素标记,用于叠氮修饰蛋白组定量分析,捕捉细胞内糖蛋白、脂质代谢分子。
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
文章来自西安齐岳生物小编wyh。

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