旷场实验（Open Field Test, OFT）是评价小鼠自主活动、探索行为与基础焦虑的经典初筛范式。传统研究多仅统计总运动距离与中央进入次数，指标单一、假阳性率高，尤其不适用于活动型厌食模型。
厌食小鼠存在特征性昼夜活动亢进、空间探索退缩、边缘刻板绕行等细微表型，常规统计极易将病理性多动误判为正常自发活动。本文采用空间分区+行为细分的改良编码方案，可精准区分运动能力亢进与情绪介导的空间回避行为。
一、范式核心原理
小鼠在陌生开阔环境中存在“探索本能”与“开阔恐惧”的天然趋避冲突。
正常小鼠兼顾中心探索与周边活动，空间分布均匀；焦虑及厌食模型小鼠表现出典型的边缘聚集、中心回避，同时伴随持续绕行、刻板巡边等亢进行为。
普通多动小鼠全程全域均匀活动，无空间偏向。通过区分全域运动、边缘刻板运动、中心探索行为，可剥离单纯体能升高与情绪异常引发的空间行为偏移，大幅提升模型特异性。
二、标准化前期准备
小鼠旷场实验，XR-XZ301，上海欣软
实验采用50 cm×50 cm×40 cm方形避光敞箱，软件自动划分中心区与边缘区，中心区域设定为箱体正中25 cm×25 cm范围。环境恒温22±1 ℃，均一光照400 lux，无明暗阴影偏差。
测试前30 min将小鼠移入静音行为室适应环境，消除转运应激。
所有小鼠雌雄分批次检测，雌性同步记录动情周期。
成套行为学顺序中将旷场置于首位，作为基础活动与情绪基线筛查，避免后续高应激实验干扰本底行为。
单只测试结束使用75%乙醇擦拭箱壁与底面，彻底清除气味、尿液残留，待箱体完全风干后进行下一只检测。
三、精细化改良测试流程
正式测试时长5 min，全程俯视录像采集，离线精细化编码分析。
将小鼠行为分为三类：中心探索行为、边缘绕行行为、静止观望行为。
中心探索定义为四肢完全踏入中心区域的自由移动与探查；
边缘刻板行为定义为紧贴箱壁连续绕行、无停顿、无跨区探索；
静止行为为躯体停留不动、仅头部小幅转动。
全程禁止人员靠近箱体、俯视或走动，避免外源干扰导致避险行为升高。
四、多维指标联合判读
除常规总运动距离、平均速度外，新增核心改良指标：
总运动距离显著升高（活动亢进），但中心探索时间显著降低、边缘刻板绕行占比大幅升高。
运动能力正常的焦虑小鼠仅中心探索下降，无活动亢进表现。
单纯自发多动小鼠全域分布均匀，无边缘聚集现象。通过多指标联合校正，可完全区分运动亢进、基础焦虑、空间探索缺陷三类表型。
五、关键误差控制要点
箱体光照不均会造成小鼠明暗偏好，干扰中心回避结果；
未彻底清除气味残留会导致小鼠持续嗅探、行为紊乱；
仅统计总距离不区分空间分布，会完全掩盖厌食模型特征性刻板多动；
测试顺序后置会导致应激累积，压低探索行为基线。
标准化环境参数与精细化分区统计，可有效规避常规旷场实验的数据离散与假阳性问题。
参考文献
1. Prut L, Belzung C. The open field test as a tool to investigate anxiety-like behavior in mice[J]. European Journal of Pharmacology, 2003, 463(1-3):3-33.
2. Zhang Y, et al. Spatial distribution and stereotyped locomotion distinguish anorexia-related hyperactivity from general hyperactivity[J]. Behavioural Brain Research, 2022, 428:113876.
3. 刘沐阳, 等. 旷场空间分区行为分析优化小鼠焦虑与多动表型判定[J]. 中国比较医学杂志, 2023, 33(11):88-93.
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