人α干扰素(IFN-α)ELISA Kit

供应商：深圳市恒昊生物科技有限公司

什么是人α干扰素（IFN-α）

人α干扰素是一类由白细胞（主要是浆细胞样树突状细胞）受病毒或病原体刺激后合成分泌的小分子可溶性糖蛋白，分子量约为19-26kDa。它的核心生物学功能包括三个方面：

  1. 抗病毒作用：IFN-α可以诱导细胞产生抗病毒蛋白，抑制病毒的复制与传播，是机体抵御病毒感染的第一道防线，常用于乙型肝炎、丙型肝炎等病毒性疾病的治疗研究；
  2. 免疫调节作用：可以激活自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞的杀伤活性，增强机体的免疫监视能力；
  3. 抗肿瘤作用：能够抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，在血液系统肿瘤、实体瘤的免疫治疗中也有广泛应用。

在临床与科研中，定量检测血清、细胞培养上清等样本中的IFN-α含量，可以帮助评估机体免疫激活水平、监测干扰素药物疗效，辅助诊断病毒感染性疾病、自身免疫病等。

打开网易新闻 查看精彩图片

操作注意事项

ELISA实验的结果受试剂处理、操作细节影响较大，想要获得稳定准确的检测结果，需要注意以下多方面细节：

（一）试剂盒与样本处理

  1. 试剂复温：试剂盒从冰箱取出后，需要在室温（18-25℃）平衡至少30分钟，让试剂温度恢复至室温后再使用，否则会因为温度不均导致加样误差、显色不均。未用完的试剂需要及时放回2-8℃冰箱保存，注意避免冻存浓缩洗涤液。
  2. 样本保存与预处理
  • 血清/血浆样本：采集后建议尽早检测，短期可放置于2-8℃，长期保存需要分装后置于-20℃或-80℃冰箱，避免反复冻融——反复冻融会导致IFN-α蛋白降解，使检测结果偏低；
  • 细胞培养上清样本：采集后需要离心去除细胞碎片，取上清即可检测，若有沉淀需要过滤后再检测，避免杂质堵塞微孔影响结合；
  • 若待测样本中IFN-α浓度超出试剂盒的检测范围，需要用试剂盒配套的样本稀释液进行适当稀释后再检测，否则会出现“钩状效应”，导致结果不准确。

（二）操作过程要点

  1. 加样：加样时需要注意不要溅出孔外，也不要触碰微孔内壁的包被层，加样时间尽量控制在15分钟以内，避免先加样的孔孵育时间过长，导致误差增大。如果使用移液器加样，需要定期校准移液器，避免移液误差。
  2. 洗板：洗板是去除非特异性结合、降低背景值的关键步骤，不能偷懒减少洗涤次数。洗板时要保证每孔都加满洗涤液，每次洗涤后充分拍干微孔板，拍完板后不要让微孔长时间干燥，完成洗涤后尽快进行下一步操作，若使用自动洗板机，需要定期疏通针头，避免针头堵塞导致洗板不充分。
  3. 孵育：孵育需要严格按照试剂盒说明书控制温度和时间，孵育时要盖上封板膜，避免液体蒸发，同时防止样本交叉污染。温浴过程中不要随意移动微孔板，避免液体洒出。
  4. 显色：显色剂需要避光保存，加入显色剂后也要避光孵育，避免光照导致底物自发氧化，造成背景偏高。显色时间需要根据说明书控制，不要过长也不要过短，标准孔出现明显梯度颜色后即可加入终止液。