前段时间课题组完成了特异性荧光标记探针的设计与制备,准备开展细胞样本的荧光原位杂交(FISH)实验,接下来的核心问题是筛选一款合适的杂交试剂盒进行后续试验。试剂盒选型阶段,课题组一致认为使用进口试剂更稳妥,所以大家结合文献参考以及经销商推荐,最终购入了一款细胞FISH领域的经典进口配套试剂盒—德国ZytoLight FISHCytology Implementation Kit。抱着进口试剂稳定性强、质控靠谱的心态,我们直接用实验室常规细胞爬片完成首轮预实验,计划将其作为实验室长期使用的FISH试剂盒。

但首轮预实验结束后,我们都陷入了纠结。不可否认,Zyto杂交试剂盒的细胞消化、严谨洗涤、DAPI封片等配套试剂质控规范、体系成熟,基础实验稳定性不错,但实验过程中我们也遇到了很多问题。首先,该产品仅为细胞学FISH前后处理辅助试剂盒,试剂盒中不含杂交缓冲液,使用过程中我们需要自行采购、配制杂交体系,摸索杂交浓度、温度、孵育时长等核心参数,耗费了大量的时间与人力成本。其次,我们本来还计划补充组织层面实验,但是要进行这个实验就必须额外采购组织专用试剂盒才能进行,被迫购买两套试剂盒,无形间增加了经费与操作负担。整体使用下来大家都认为这款试剂盒这款试剂盒虽然基础质量稳定,但操作步骤繁琐、孵育洗涤节点多,并不适合我们自行构建荧光探针以及科研批量实验的需求。

为了寻找更合适的FISH试剂盒,我们又购入了国内市场上品牌认可度较高的BIOG荧光原位杂交试剂盒Ⅰ,用同一批次细胞爬片开展了平行预实验。起初我们对这款试剂盒都没有报太大的希望,都只是尝试的心态。但实际操作体验却远超预期,彻底改变了我们对国产试剂的刻板印象。

相较之下,BIOG杂交试剂盒的使用体验真的省心太多,特别适合用于批量做实验。试剂盒本身就配有核酸亲和杂交液,实验过程中我们不需要自行配置杂交液,摸索杂交体系,完美适配自制的探针,为实验省去了很多的麻烦。而且跟着说明书的步骤做下来,步骤都很简洁,不需要预杂交,也没有复杂的多轮孵育扩增步骤,实验效率大幅提升,对我们即将进行大批次荧光原位杂交的实验者来说非常友好。从细胞样本的最终成像来看,实验效果(见图1)也十分理想,靶标的阳性信号清晰集中、辨识度高,几乎没有杂乱的非特异性背景荧光。此外,为了进一步验证该试剂盒的通用性,我们还使用同款试剂盒进行了石蜡组织切片的FISH检测,全程实验体系稳定、结果重复性好,非常适合我们课题后续进行多样本、多场景的实验。

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经过这两轮的预实验我们一致决定,后续正式实验统一使用百代BIOG荧光原位杂交试剂盒Ⅰ。很多同学会习惯性盲目信任进口试剂,默认进口体系就是最优选择,但这次的试剂盒选型经历,也让我们意识到,如今的国产科研试剂早已迭代完善,在保障实验高效、结果稳定可靠的前提下,还兼顾了操作简便、通用性强、性价比高等多重优势,完全可以满足基础科研的各类实验需求。如果大家也要进行FISH实验,不妨也去尝试一下这款试剂盒,我想它会给你带来不一样的使用感受!

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