原理说明：设备采用内置隔膜液泵直排废液，无需抽滤瓶，三联独立控制;整套操作需要在超净工作台(层流台)内完成，严格执行无菌操作，适配 Φ50 mm 微孔滤膜、100 ml 滤杯，可选用可重复 EJ‑3B 滤杯或者一次性滤杯。
一、实验前准备
环境与设备检查
将仪器平稳放置于超净工作台内，接通 AC220V/50Hz 电源;检查设备外观、排液管路，废液容器摆放到位;确认三个滤头独立开关处于关闭状态。设备整机为 304 不锈钢，可擦拭消毒;可重复使用的滤杯、滤头支撑件，采用 121℃湿热灭菌，也可以使用火焰枪对滤头做快速灭菌;一次性滤杯直接取用无菌包装成品。
耗材准备
准备 Φ50 mm 无菌微孔滤膜(一般微生物限度选 0.45 μm，无菌相关检测选 0.22 μm)、无菌取膜器 / 无菌镊子、pH7.0 氯化钠‑蛋白胨缓冲液(冲洗液)、配制完成的固体培养基、待测供试品、阴性对照样品。
提示：滤头边缘带有凹槽设计，方便放膜、取膜，减少滤膜破损风险。
供试液制备
按照药典或者对应检测标准制备供试液：液体样品可直接取样或稀释;固体样品需要溶解、稀释处理;同时准备阴性对照，用于监控操作过程是否引入污染。
二、设备组装(无需工具，手工拆装)
在洁净环境下，把灭菌完成的滤头支撑底座安装到位;
用无菌镊子夹取无菌滤膜，平整放置在滤头支撑网中央，滤膜不能有褶皱、偏移，完全覆盖支撑面，利用滤头凹槽定位，防止滤膜移位;
将灭菌后的滤杯(可重复 EJ‑3B 滤杯或一次性滤杯)手工卡合安装到滤头上，确认密封良好;
如果多组样品同时检测，可把三组滤头全部装好;样品少时，只装配需要使用的通道，其余通道保持关闭。
建议加入少量无菌冲洗液，开启对应通道润湿滤膜，再关闭通道，避免干膜产生气泡影响截留效果。
三、样品过滤操作(核心步骤)
将预处理好的供试液缓慢注入滤杯内部，单杯不超过滤杯 100 ml 容积;若是大体积水样，可以分次加注。
开启仪器电源，打开对应通道的独立控制开关，内置隔膜液泵启动，泵流量≥700 ml/min，废液直接由设备管路排出至废液容器，不需要抽滤瓶。微生物被截留在滤膜之上，液体被抽走。
操作要点：三个通道可同时开启做平行样;也可单独开启某一路，其余关闭;不要一次性全部打开不需要的通道。
供试液过滤完毕后，按照方法适用性试验要求，加入无菌冲洗液冲洗滤杯内壁与滤膜，消除样品抑菌成分，冲洗完成后继续抽干滤膜表面残留液体抖音百科。
全部液体抽滤完成，先关闭该通道开关，再进行拆卸，避免负压倒吸带来污染。
四、取膜、铺放培养基
在无菌条件下，手工取下滤杯;借助设备凹槽结构，使用无菌取膜器或者无菌镊子小心揭取滤膜。务必保证截留微生物的一面(菌面)朝上。
将滤膜平贴到预制固体培养基表面，轻轻按压，滤膜与培养基之间不能留存气泡，防止菌落蔓延。
盖上培养盒盖子，形成封闭培养盒，做好样品编号标记。
同步处理阴性对照滤膜，用于判定操作污染情况。
五、恒温培养与菌落计数
将封闭好的培养盒放入恒温培养箱，按照标准设置培养温度与时长：
细菌计数：30‑35℃;
霉菌酵母菌计数：23‑28℃。
培养周期结束，取出培养盒，观察滤膜表面菌落生长，统计菌落数量。结合取样体积、稀释倍数，计算供试品的微生物限度结果，完整记录实验数据，满足溯源要求。
六、实验结束，设备拆卸与维护
全部实验完成，关闭仪器电源;在层流台内手工拆卸滤杯、滤头组件。
一次性滤杯按医疗废弃物处理;可重复 EJ‑3B 滤杯、支撑件清洗干净，晾干后灭菌备用。
304 不锈钢机箱表面使用合适消毒液擦拭，清除废液残留，保持干燥;清理废液容器。
管路定期做清洗，防止废液残留滋生微生物，为下一次试验做好准备。
七、重要注意事项
全程严格无菌，全部过滤操作必须在超净工作台完成;
滤膜必须完整，不能出现破损，否则会造成微生物漏检;
设备负载噪音≤60dB (A)，但层流台内依然需要注意防护;整机重量 8 kg，移动时轻拿轻放;
滤杯最大容积 100 ml，不要超量加注样品;
做完阴性对照，确认无杂菌生长，本次实验数据才有效。
热门跟贴