外科手术进行当中,当外科医生肉眼无法判断病灶性质,需要立刻决定手术范围时,就会切取部分病变组织,紧急送往病理科做“术中冰冻切片诊断”。这份来自手术室的新鲜标本,是手术台上的“紧急医学物证”。不同于耗时数日的常规石蜡病理,它要在极短时间内完成全套处理,快速给出参考意见,指导外科医生实时调整手术方案。很多人好奇:手术中送过来的冰冻标本,在病理科经历了怎样一场“极速闯关”?它的结果就是最终确诊吗?
接收与巨检取材:争分夺秒的紧急“面诊”
冰冻标本由手术室专人快速转运至病理科,全程不能添加固定液,必须保持组织新鲜,这是整套冰冻流程的起点,也是质量把控第一道关卡。
核对登记,分秒必争:严格执行“三查七对”,逐项核对患者姓名、住院号、手术部位、标本信息,精确记录标本接收时间。一旦信息核对发现疑点,第一时间和手术室沟通确认,杜绝标本错配风险。核对完成后即刻录入系统,开启倒计时模式。
肉眼观察,精准取材:病理医师立刻对新鲜标本开展大体检查,观察记录标本大小、颜色、质地、病灶边界、有无出血坏死;对需要评估的手术切缘做好标记。结合肉眼判断,挑选最具代表性的病变区域切取小块组织用于冰冻制片。受时间限制,冰冻取材数量有限,优先选取核心可疑病灶;而送检后剩余全部组织,会全部保留,留作后续常规石蜡病理检测使用。
急速冷冻:把软组织冻成可切片的“冰冻硬块”
常规石蜡依靠脱水浸蜡实现组织硬化,需要十几个小时;而冰冻依靠低温速冻,在数分钟内让新鲜组织变硬,满足切片条件。
取材完成的组织块放置在涂有冷冻包埋剂(OCT)的标本托上,送入冰冻切片机内部。机器内部维持?18℃~?25℃低温,短短2?3分钟,组织连同包埋剂一同冻结凝固,变成坚硬的固态组织块。速冻会不可避免产生冰晶假象,这也是冰冻切片的先天局限,但为了争取手术时间,这是必不可少的处理环节。
注意:冰冻只做临时制片;冻完之后,这块组织并不会永久保存为冰冻块。冰冻取材过后,所有用过以及剩余的组织,后续都会放入福尔马林固定,转入常规石蜡病理流程,完成最终诊断复核。
切片与快速染色:低温下产出临时病理玻片
冻硬的组织块,要快速切出超薄切片、完成染色,才能交给病理医生显微镜阅片。整套制片工作,要求在十余分钟内完成。
低温超薄切片:技师在冰冻切片机内修整组织表面,切出厚度4?6μm的超薄组织薄片,将薄片平整贴附于常温载玻片上。冰冻切片比石蜡切片更容易破碎、褶皱,十分考验技师操作熟练度。
快速固定、染色封片:切片立刻进行快速固定,随后使用快速HE染色程序完成染色。和常规石蜡长时间染色不同,冰冻染色是加速版本,快速区分细胞核与细胞质结构,制作出可供镜下观察的冰冻切片。一张冰冻玻片就此完成,但它属于临时切片,图像质量整体弱于常规石蜡切片。
镜下诊断与报告反馈:30分钟内的术中参考判断
冰冻切片完成,立刻交由高年资病理诊断医师阅片,这是决定手术走向的关键一步,原则上单件标本从接收标本到出具报告,控制在30分钟以内;多份标本同时送检时时间会相应顺延。
显微镜下快速研判:医师先低倍镜浏览整体组织架构,再切换高倍镜观察细胞形态,重点回答临床最关心的核心问题:病变是良性还是恶性?手术切缘有没有肿瘤累及?送检是不是目标病变组织?淋巴结是否出现转移?受限于冰冻制片带来的细胞冰晶肿胀、结构假象,部分交界性、疑难病变很难直接下定论。
审慎评估,允许延迟诊断:术中冰冻是参考性诊断,不等于最终确诊。遇到形态模糊、证据不足的疑难病例,病理医师不会强行给出确定结论,可以出具“待石蜡切片进一步确诊”意见,等待后续常规病理。复杂、高度疑难病例,会即时和手术医生沟通病情,必要时科内简短会诊后再出具意见。
报告快速传回手术室:冰冻诊断结果通过电话、书面报告快速反馈回手术室。外科医生拿到结果,当即决定后续手术操作:是直接结束手术,还是扩大切除范围、清扫淋巴结。所有冰冻记录、报告时间精确到分钟,完整归档留存。
冰冻标本的后续归宿:石蜡复核才是“最终判决”
很多患者会误以为冰冻报告就是最终结果,事实上,术中冰冻只用于术中手术参考,金标准是后续常规石蜡病理报告。
冰冻取材使用过的组织碎片,以及送检标本中所有未做冰冻的剩余组织,全部放入福尔马林固定液中固定,进入我们熟悉的常规石蜡病理全流程:脱水、包埋成石蜡块、切片、染色。病理医师会把石蜡切片和之前的冰冻切片对照观察,开展全面、多点取材阅片,必要时加做免疫组化、特殊染色,做出完整、严谨的最终病理诊断。
冰冻原始切片会妥善归档保存;后续生成的石蜡蜡块、石蜡切片,按照规范长期存档,保存期限不低于15年,用于复查、会诊与科研教学。只有经过石蜡流程处理之后确认不需要留存的残余组织,才会按照医疗废物规范做无害化销毁。
结语
从手术室紧急送样,到冰冻、切片、阅片,再到标本转入石蜡复核,一场术中冰冻,是病理科和手术台的一场生死竞速。追求“快”的同时,却也存在客观技术局限,它的准确率达不到常规石蜡病理的水平,有一定概率出现延迟诊断、或者和后续石蜡报告不一致的情况。
我们看到的30分钟极速报告,只是整个故事的上半篇;完整、权威的病情答案,依然要等待3?7个工作日后的常规石蜡病理报告。每一次冰冻诊断的审慎取舍,每一次后续石蜡的复核对照,都是为了兼顾手术效率与诊断安全,守护每一台手术的精准诊疗。
文 | 柴嘉音
编辑 | 宣传中心 郝洁
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