热启动聚合酶链式反应(Hot start PCR)是一种改良的聚合酶链式反应方法,主要用来避免操作过程中产生非特异性序列的扩增。将DNA聚合酶与其他反应物隔绝,或是使用在高热状况下才会活化的聚合酶,避免在未达到设定温度前就开始反应。

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热启动PCR有几种方式:

蜡隔绝法:将除了聚合酶以外的反应物加入PCR管后,加滴熔融的石蜡;待石蜡凝固后再加入聚合酶。放入PCR仪开始反应升温后,石蜡融化浮至最顶层,聚合酶才与其他反应物混合。石蜡可同时作为防止蒸发用。

热启动聚合酶(化学型):经过化学分子修饰的聚合酶,高热下结构改变而启动。

热启动聚合酶(抗体型):带有针对聚合酶的免疫抗体,高热下使抗体分离而启动。

热启动聚合酶(共价键结合型):改良自抗体型,使用小分子的化合物,阻塞聚合酶作用位置,高温下分离。

河北三狮生物科技有限公司现推出了一款热启动Taq DNA聚合酶,该产品酶激活时间短、保证酶活、亲和力强、灵敏度高,可以大大降低PCR反应时间。

产品介绍

本产品是抗体封闭型热启动酶,可抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引超的非特异性扩增,适用于Hot Start PCR。由于抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已失活,因此无需特珠灭活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。使用本产品扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基,因此可直接克隆于T-Vector中,也可以在末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端载体中。

产品用途

Hot Start PCR

DNA序列测定