产品介绍
AntibodySystem推出哺乳系统重组表达的CU43-Fc (货号:EXX25001)和大肠杆菌重组表达的His-CU43 (货号:YXX25001),经验证均具有很高的酶活性。
CU43只能特异性切割正确折叠的Human IgG的Ans297位点的N-糖基,IgG变性后无法切割。
1,3:Human IgG1 Fc
2:Human IgG1 Fc加CU43-Fc
4:Human IgG1 Fc加His-CU43
酶切缓冲液:PBS pH 7.4
酶切条件:4℃,16小时
背景介绍
自身免疫性溶血性贫血(Autoimmune Hemolytic Anemia, AIHA)和登革热疫苗引起的抗体依赖性增强(Antibody-Dependent Enhancement, ADE)效应都与IgG Asn297位点糖链与FcγR的相互作用相关。切除IgG中Asn297位点的糖链有望改善自身免疫性溶血性贫血,并降低登革热疫苗引起的ADE效应。
目前切割N-连接糖链的酶主要有PNGase F (YXX04901, AntibodySystem),Endo S (YXX05201, AntibodySystem)和Endo S2 (YXX06601, AntibodySystem)。PNGase F能切割任意位点的N-连接糖链,无位点特异性;Endo S 特异性切割复杂型N-糖基;Endo S2能够切割IgG上的复杂型,高甘露糖性和杂合型三类N-糖基;特异性切割IgG中Asn297位点的糖链的酶非常罕见。
2024年10月21日,国际权威学术期刊Cell在线刊发了美国埃默里大学医学院的科研成果,标题为:Potent efficacy of an IgG-specific endoglycosidase against IgG-mediated pathologies。他们通过生物信息学方法筛选到一个可以特异性切割Human IgG中Asn297位点的糖链的糖苷内切酶CU43。
体外实验
研究人员结合生物信息学预测和质谱鉴定得到了10个糖苷酶,分析了10种糖苷酶的去糖基化效果,发现CU43无法切除RNase B的糖链,但是可以高效切割Human IgG Fc区域的复杂型N-糖链,而对Mouse IgG Fc区域的糖链无法切割。
体内实验
由于CU43在体外具有非常高效的酶切活性和极高的底物特异性,研究人员利用转基因小鼠模型对CU43的体内活性进行研究。研究发现,CU43-Fc能有效防止抗体介导的CD4+ T细胞清除和B细胞清除,能防止抗体介导的自身免疫性溶血性贫血的发生,并且能够阻断登革热病毒抗体介导产生的ADE效应。
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