解锁仑昌硕一步法ELISA，科研新突破！|elisa|仑昌硕|抗体|抗原|显色|特异性

仑昌硕一步法 ELISA 是一种先进的酶联免疫吸附测定技术，以下是其详细介绍：

检测原理

抗原 - 抗体特异性结合：ELISA 的基础是抗原与抗体的特异性结合。在仑昌硕一步法 ELISA 中，当样本中的抗原加入到已包被有抗体的酶标板孔中时，二者会精准结合，这种结合具有高度特异性，保证了检测的准确性，如检测某种病毒感染时，病毒表面蛋白作为抗原，可与对应的抗体特异性结合。
酶标记的信号放大：一步法 ELISA 中的标记抗体带有酶标记物，常用辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（ALP）等。当抗原 - 抗体结合完成后，加入底物溶液，在酶的催化作用下，底物发生化学反应产生可被检测到的信号，通常为颜色变化。例如辣根过氧化物酶可催化过氧化氢和四甲基联苯胺（TMB）发生反应，TMB 被氧化后从无色变为蓝色，加入终止液后变为黄色，且颜色深浅与样本中抗原含量成正比，通过这种酶标记的方式可将抗原 - 抗体结合的信号放大，即使样本中抗原含量较低，也能被灵敏检测出来。
一步法的特殊设计：传统 ELISA 需分别孵育抗原和不同的抗体，并进行多次洗板操作，而仑昌硕一步法 ELISA 将待测样本和标记抗体同时孵育，抗原进入体系后能快速与标记抗体结合，样本中的抗原与酶标抗体的结合以及酶标抗体与预先包被在板孔上的抗体的结合几乎同时进行，减少了中间的孵育和洗板步骤，仅需一次洗板操作去除未结合物质后，即可直接加入底物显色，通过检测颜色变化确定抗原含量，提高了检测效率，也减少了因多次操作带来的误差。

检测步骤

实验前准备：准备好仑昌硕一步法 ELISA 试剂盒，检查试剂是否在有效期内及有无变质或沉淀等异常情况；根据检测目的采集合适样本，如血清、血浆、细胞培养上清液等，并进行预处理，如离心、过滤等，以去除杂质和细胞碎片等，同时需准备阳性对照和阴性对照样本。
加样：在酶标板的相应孔中分别加入待检样本、阳性对照和阴性对照，一般每孔加入 100 μL 左右的样本或对照液，注意避免产生气泡。
孵育：将酶标板放入孵育箱中，在 37℃孵育 30 分钟至 1 小时，使样本中的抗原与酶标板上的抗体以及标记抗体能够充分结合。
洗涤：孵育结束后，甩掉孔内液体，然后在每孔中加入洗涤液，一般每孔加入 300 μL 左右，浸泡 1-2 分钟后甩掉，如此反复洗涤 3-5 次，以去除未结合的物质。
显色：在洗涤后的酶标板每孔中加入底物溶液，一般每孔加入 100 μL 左右，然后将酶标板放入孵育箱中，在 37℃避光孵育 10-30 分钟，使底物在酶的催化作用下发生显色反应。
终止反应：当显色达到适当程度时，在每孔中加入终止液，一般每孔加入 50 μL 左右，终止底物的反应。
结果读取：使用酶标仪在相应的波长下读取酶标板各孔的吸光度值，根据阳性对照和阴性对照的结果，判断样本是否为阳性以及抗原或抗体的含量。