EMI｜北京大学姜辉/张哲/王麟团队揭示戊型肝炎病毒可离体感染人类睾丸组织|北京大学|反恐|姜辉|张哲|特种部队|王麟(歌手)|睾丸|细胞|肝炎病毒

近日，北京大学姜辉/张哲/王麟研究团队在Emerging Microbes & Infections杂志上发表了题为“Hepatitis E virus infects human testicular tissue and Sertoli cells”的研究性论文。该研究证明了戊型肝炎病毒（HEV-3）可在体外培养的人睾丸组织、人原代睾丸支持细胞及免疫抑制家兔模型睾丸组织中复制，并改变睾丸支持细胞的炎性稳态，这些发现为解释慢性戊肝患者精液中病毒持续存在提供新的理论依据。

在全球范围内，戊型肝炎病毒(HEV)感染很常见。在精液中发现的高病毒载量和持续的病毒脱落表明HEV在人类男性生殖道内复制，但其靶器官是未知的，并且缺乏适当的模型。该研究的目的是确定HEV在人类睾丸中的嗜性及其对男性生殖健康的潜在影响。

研究结果，如下：

1、HEV3病毒在人类睾丸组织中复制并释放感染性病毒粒子（图1）

研究人员利用HEV-3、HEV-1和HEV-C1（大鼠HEV）不同基因型戊肝病毒感染离体培养的人睾丸组织，发现HEV3可以在70%（7/10）的睾丸组织中成功建立感染并复制，而HEV-1和HEV-C1组未见病毒复制；添加临床常用的免疫抑制剂他克莫司后，发现其增加了HEV感染睾丸的成功率，全部睾丸组织（10/10）均显示被感染。研究者进一步将HEV感染后的人睾丸组织培养基上清接种到易感动物沙鼠中，可检测到动物出现粪便排毒以及血清抗体阳转，提示离体培养的人睾丸组织产生了具有感染性的子代HEV。

图1 HEV在人类睾丸组织中的复制

2、HEV3感染人睾丸外植体中的支持细胞和生殖细胞，并且会造成组织损伤（图2）

人睾丸组织免疫荧光结果显示，睾丸生精细胞和支持细胞均有HEV蛋白表达，说明HEV对人睾丸中的生殖细胞和体细胞均有趋向性。HEV-3感染可以引起体外培养的睾丸组织生精小管变薄、生精细胞丢失等轻度损伤，且培养上清中分泌的促炎因子IL-18的分泌较阴性对照组显著升高。

图2 体外感染HEV的人睾丸细胞的特征和形态

3、HEV1和HEV3感染原代人支持细胞，HEV3改变细胞分泌组（图3和图4）

为了进一步探索支持细胞的潜在生产性感染，将HEV1和HEV3株培养并接种原代人支持细胞，并监测病毒复制随时间的动态变化。HEV3可以感染原代人Sertoli细胞，而HEV1感染人Sertoli细胞的效率低于HEV3。

图3 HEV在人原代支持细胞中的复制

图4 HEV感染后人原代支持细胞分泌组

4、家兔睾丸内宿主对慢性HEV感染反应的转录组分析（图5）

睾丸内宿主对慢性HEV感染的反应尚不清楚。考虑到难以获得合适的人类样本，研究者使用慢性HEV感染的家兔模型探究HEV感染对睾丸组织的影响。通过对慢性感染期家兔睾丸转录组结果进行分析，发现Tssk3、Galntl5等精子发生相关基因表达下调，提示慢性HEV感染的雄兔生殖系统受到影响。

图5 他克莫司治疗兔慢性HEV3感染的睾丸内转录组分析

北京大学第三医院泌尿外科/生殖中心张哲副研究员/主治医师、北京大学医学部基础医学院王麟副研究员、北京大学第一医院姜辉教授为本文共同通讯作者，博士生刘天旭、博士生曹亚磊为本文共同第一作者。该研究还得到了中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的尹鑫研究员、夏长友研究员和张贺博士的重要帮助。