【CMT&CHTV 文献精粹】
导语：本研究突破性地揭示了EGFR/野生型RAS信号轴的反馈激活是限制现有KRASG12D抑制剂疗效的关键因素，不仅为克服肿瘤异质性带来的治疗挑战提供了新的分子机制，也为开发更有效的个体化治疗方案开辟了新方向。
KRAS蛋白是一种关键的信号转导蛋白，其基因发生突变（特别是G12D位点突变）可能导致功能的改变，引起细胞失控增殖，从而形成肿瘤。在结直肠癌（CRC）中，KRASG12D突变的发生率约为10%~12%，这种突变与肿瘤转移风险的增加和预后不良显著相关。然而，由于KRASG12D突变CRC具有高度的异质性和复杂性，针对这种突变的临床治疗策略目前仍面临挑战。尽管有一些KRASG12D抑制剂（如MRTX1133）已进入临床试验阶段，但其疗效尚未明确。此外，一些研究也指出，即使在使用KRASG12D抑制剂的情况下，肿瘤细胞也可能通过激活其他信号通路来产生耐药性。
为应对这一挑战，2023年4月，《Oncogene》杂志发表了一篇题为《Feedback activation of EGFR/wild-type RAS signaling axis limits KRASG12D inhibitor efficacy in KRASG12D-mutated colorectal cancer》的文章，揭示了KRASG12D抑制剂在治疗KRASG12D突变CRC中效果受限的可能机制，即EGFR/野生型RAS信号轴的反馈激活。这一发现不仅填补了这一领域的研究空白，也为开发更有效地治疗KRASG12D突变CRC的策略提供了新的启示。
研究方法
本研究是一项结合了高通量遗传筛选、生化分析和治疗实验的综合性研究，旨在探索KRASG12D突变CRC对MRTX1133的敏感性并发现改进的治疗策略。研究中，对KRASG12D突变的CRC细胞系进行了MRTX1133处理，通过CRISPR-Cas9筛选、RNA测序和西方印迹等技术，分析了MRTX1133处理后的细胞生长、细胞周期、基因表达变化以及蛋白活性变化。此外，还建立了患者来源的有机类器官（Patient-Derived Organoids, PDOs）模型和细胞系衍生的异种移植瘤模型，用以评估MRTX1133单独使用和与EGFR抑制剂联合使用时的疗效。
研究结果
MRTX1133对KRASG12D突变CRC细胞的影响
本研究首先评估了MRTX1133对KRASG12D突变CRC细胞的生长抑制效果。结果显示，MRTX1133处理能够引起KRASG12D突变CRC细胞的生长停滞，这一作用在纳米摩尔级别浓度下表现显著，IC50值在5到40 nM之间。此外，通过细胞周期分析发现，MRTX1133能够引起G2/M期阻滞，这是KRAS突变抑制的典型后果。
MRTX1133治疗后的可逆性和RAS信号通路的反弹
值得注意的是，MRTX1133引起的细胞生长停滞是可逆的。在药物洗脱实验中，细胞在MRTX1133洗脱后迅速恢复生长。RNA测序和西方印迹分析揭示了MRTX1133处理后RAS效应信号通路的反弹现象，即在早期（3小时）MAPK和AKT靶基因表达被抑制，但在24小时后部分恢复，表明RAS效应通路的反弹可能是MRTX1133疗效受限的关键因素。
EGFR是MRTX1133疗效的关键调节因子
通过CRISPR-Cas9筛选，研究者发现EGFR、PLK1、AURKA和PIK3CA是MRTX1133疗效的关键调节因子。特别是EGFR，在遗传筛选和化学抑制剂筛选中均显示出与MRTX1133协同致死的效果。进一步研究表明，MRTX1133通过下调ERRFI1的表达，导致EGFR反馈激活，进而激活野生型RAS，包括H-RAS和N-RAS，这一过程与RAS效应信号通路的反弹密切相关。
EGFR抑制剂与MRTX1133的协同效应
在体外实验中，EGFR抑制剂（如西妥昔单抗或吉非替尼）与MRTX1133联合使用显示出显著的协同效应，能够显著增强对KRASG12D突变CRC细胞的抑制效果。这一协同效应在PDOs和异种移植瘤模型中也得到了验证，表明EGFR抑制剂能够提高MRTX1133的疗效，抑制肿瘤生长，并在停药后仍显示出持久的抗肿瘤效果。
总结
本文揭示了EGFR反馈激活是限制KRASG12D抑制剂疗效的一个关键分子事件，并且提出了一种新的治疗模式，即通过联合使用KRASG12D和EGFR抑制剂来提高治疗效果。这一发现不仅为KRASG12D突变CRC的治疗提供了新的策略，也为其他KRAS突变癌症的治疗提供了新的思路。此外，研究中使用的PDOs模型和异种移植瘤模型为临床治疗的相关性提供了强有力的支持，使得研究成果更具转化潜力。随着精准医疗的不断进步，针对特定分子事件的靶向治疗将为结直肠癌患者带来更多的生存希望。
参考文献：
Feng J, Hu Z, Xia X, et al. Feedback activation of EGFR/wild-type RAS signaling axis limits KRASG12D inhibitor efficacy in KRASG12D-mutated colorectal cancer[J]. Oncogene. 2023;42(20):1620-1633.
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