梅毒RPR（快速血浆反应素）检测操作流程

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一、检测原理

RPR检测通过检测患者血清中的反应素（抗心磷脂抗体）进行梅毒筛查，属非特异性抗体检测。阳性结果需经TPPA等特异性检测确认。

二、样本采集与处理

1. 采集：静脉采集3-5mL全血于无抗凝剂试管（或含分离胶）。
2. 处理：室温凝固后，离心（3000rpm，10分钟），分离血清。避免溶血、脂血或污染。
3. 保存：2-8℃保存≤72小时，长期保存需-20℃以下，避免反复冻融。

三、试剂与仪器准备

1. 试剂：有效期内RPR试剂盒（含抗原悬液、对照卡片、滴管/针头）、阳性/阴性对照品。
2. 仪器：水平旋转仪（100±2rpm）、移液器、计时器。
3. 环境：室温（23-29℃），避免强光或震动。

四、检测步骤

1. 加样

• 定性检测：50μL血清滴于卡片圆圈内，扩展至直径约18mm。
• 定量检测（滴度测定）：用生理盐水倍比稀释血清（1:2至1:64等），取50μL各稀释度样本。

1. 加抗原：轻摇抗原瓶，垂直滴加1滴（17μL）抗原悬液于各样本区。
2. 混匀与反应

• 使用水平旋转仪（100rpm）旋转8分钟，或按说明书调整。
• 手动操作时，摇动卡片8分钟，确保充分混匀。

五、结果判读

1. 阴性：均匀细小颗粒，无凝集（报告“非反应性”）。
2. 阳性：肉眼可见黑色凝集块（报告“反应性”及最高稀释度滴度）。
3. 不确定：弱凝集需重复检测或结合其他评估。

六、质量控制

1. 对照检测：每批次需同时测试阳性、阴性对照，结果符合预期方有效。
2. 质控记录：记录试剂批号、有效期、操作者及质控结果。
3. 仪器校准：定期检查旋转仪转速及稳定性。

七、注意事项

1. 假阳性：妊娠、自身免疫病、HIV等可能导致，需结合临床。
2. 生物安全：穿戴防护装备，按医疗废物处理样本及耗材。
3. 治疗后监测：治疗后3、6、12个月复查，滴度下降4倍提示有效。

八、报告与解释

• 阳性：建议TPPA确认，结合病史评估活动性感染。
• 阴性：不能完全排除梅毒（如窗口期或晚期潜伏感染）。

九、局限性

RPR仅为筛查试验，不可单独确诊。高滴度可能提示疾病活动，但需综合判断。

遵循试剂说明书操作，确保检测准确性，及时更新操作规范。