品名:5-dR6G,琥珀酰亚胺酯(5-dR6G, succinimidyl ester)
用途:科研
一、基本描述

5-去氧-罗丹明6G(5-dR6G)琥珀酰亚胺酯是一种绿色荧光染料的活性酯形式,属于罗丹明类衍生物。该染料通过在罗丹明6G分子上去除5位羟基并引入琥珀酰亚胺基团,获得了对一级胺高度反应活性的酯形式,广泛用于蛋白质、肽类及其他含胺生物分子的共价标记。5-dR6G具有明亮的荧光、高量子产率、良好的光稳定性以及水溶性,在生物成像、荧光检测和分析技术中具有广泛的应用前景。
二、化学性质
5-dR6G属于三环芳香胺类染料,具有经典的罗丹明骨架结构。其发射波长约为552–560 nm,激发波长为520–530 nm,显示明亮的黄色至橙色荧光。去除5位羟基后分子变得更稳定且不易水解;而通过连接琥珀酰亚胺酯(NHS ester)基团,能够在pH 7.0–9.0的缓冲液中快速与伯胺发生酰胺键形成反应。其分子结构较紧凑,易于溶解于极性有机溶剂(如DMSO、DMF)及水性缓冲液中。
分子式:C27H27N3O5
分子量:473.52 g/mol(具体值视盐形式略有差异)
激发/发射峰值:~525 / ~555 nm
量子产率:高(约为0.9)
荧光寿命:3–4 ns
稳定性:对光较稳定,不易自猝灭

三、制备方法
5-dR6G的合成一般以罗丹明6G为起始物,通过选择性地去除其5位羟基来获得5-去氧化合物,然后将该产物与含有活性的NHS酰氯或NHS与碳二亚胺(如DCC或EDC)在无水条件下缩合,生成活性琥珀酰亚胺酯。合成过程中需严格控制pH和无水条件,以防止酯基水解失活。反应产物通常通过硅胶柱层析或HPLC进一步纯化。
典型反应步骤如下:
罗丹明6G → 5-去氧衍生物;
加入琥珀酸酐与DCC,反应生成中间酯;
用NHS进行酰化,生成5-dR6G-NHS酯;
纯化并干燥,获得高纯度产品
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