中国仓鼠卵巢（CHO）细胞适合大规模工业培养，表达系统完善稳定，不易受到人类病毒感染，可表达人源糖基化修饰的优势，是生物制品制造中最常用的工程细胞。大多数的生物制剂以及几乎所有的抗体药物采用CHO表达生产。

中国药典规定，由CHO细胞表达生产的生物制品中相关宿主细胞蛋白残留量应不高于总蛋白含量的0.05%；美国药典规定的HCP水平限量值在1-100 ng/mg。

SHENTEK® CHO残留蛋白检测试剂盒（ELISA法），用于CHO细胞系表达的生物制品(单抗，重组蛋白，疫苗等) 中宿主细胞蛋白的残留检测。试剂盒按照法规要求进行了全面验证。特别是，试剂盒中的定量参考品、抗原及抗体覆盖率均采用2D和LC-MS两种方法进行了表征和验证，严格遵循ISO13485质量体系，各项性能满足CHO HCP检测需求。

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图1 CHO-HCP 抗体覆盖率（>85%）验证
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图1 CHO-HCP 抗体覆盖率（>85%）验证

采用IMBS&LC-MS方法检测，可检测到CHO HCP 2000多个，其中包含了有文献报告的CHO HCPs中的相关高风险蛋白。

技术参数

1.技术原理：ELISA双抗体夹心法；

2.线性范围：1-128ng/mL，相关系数R²>0.990；

3.定量限：1.5 ng/mL；

4.重复性：CV<15%，定量限浓度CV≤20%；

5.准确度：回收率范围80%~120%，CV≤20%；

6.特异性：与Vero、HEK293T、汉逊酵母和E.coli等宿主蛋白无交叉反应；

7.适用性：实验验证多种样本基质，且样品稀释后的HCP呈线性；

8.覆盖率：

  • 风险因子：校准品和HCP抗体均能覆盖CHO HCP常见高风险因子；
  • 方法验证：采用IMBS-2D和IMBS-MS两种方法正交检测抗体覆盖率；

9.稳定性：批内和批间一致性高，结果稳定。

表1 每个浓度样品20孔复测的准确性和重复性
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