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‘轮台’白杏(Prunus armeniaca L. ‘Luntai White’)作为新疆特色林果资源,其营养成分丰富、风味独特,已成为轮台县特色林果产业的核心支柱。然而,作为典型的呼吸跃变型果实,鲜杏采后易迅速发生呼吸跃变及乙烯合成高峰,加速后熟衰老,导致软化、腐烂及品质劣变,严重制约杏产业高质量发展。因此,开发以延长其贮藏期、提升价值为导向的保鲜技术,已成为当前产业亟待解决的关键问题。

在植物应对采后胁迫的生理机制中,多胺(PAs)与还原型谷胱甘肽(GSH)代谢扮演着重要角色。PAs(包括腐胺(Put)、亚精胺(Spd)和精胺(Spm))可通过静电作用与带负电荷的功能基团结合具备抗氧化特性,能单独或与抗氧化剂协同抑制由钙硫比失衡诱导或加剧的氧化应激,增强植物抗逆性;Spd处理能有效维持西梅果实中抗坏血酸(AsA)和GSH含量,增强活性氧清除酶活性及整体抗氧化能力,减轻细胞膜氧化损伤。Spd处理也被证明可通过调节PAs代谢维持杏果采后品质。此外,硅与Spd联用能更有效维持植物GSH氧化还原状态,协同促进Spd和Spm水平升高,显著增强抗氧化能力。GSH是重要的抗氧化剂,不仅能够赋予细胞氧化还原稳定性,还可以充当信号通路与代谢反应之间的桥梁,为生长发育提供动力。已有研究表明,外源GSH处理可延长辣椒果实贮藏时间;通过调节PAs代谢增强番茄幼苗耐盐性。褪黑素通过平衡氧化还原稳态和PAs生物合成改善大豆幼苗的耐热性;γ-氨基丁酸通过诱导GSH含量和谷胱甘肽还原酶(GR)活性提高,与PAs代谢协同增强苹果抗病性。以上研究结果说明,植物在应对非生物胁迫过程中,可能通过PAs和GSH代谢协同,增强植物抗逆性。然而,关于PAs和GSH代谢在杏果实采后品质维持方面是否存在协同作用仍不清楚。

一氧化氮(NO)作为一种内源性气体信号分子,在果蔬采后保鲜中具有抑制乙烯合成、激活抗氧化系统及诱导抗病性等多重功能。NO处理可延缓樱桃果肉褐变并保持其采后品质,并通过调节AsA-GSH循环维持杏果实采后品质。同时NO可调控香蕉PAs代谢,增强耐冷性;还能够通过影响GSH的氧化还原状态保持哈密瓜品质。这表明NO可通过调控PAs或GSH代谢维持采后品质。但目前鲜见关于NO对PAs和GSH代谢在杏果实采后品质维持中的协同调控机制的研究。

目前,NO处理多以NO供体硝普钠(SNP)的液体浸泡和常压熏蒸为主,但液体浸泡易对果实表面造成损伤且工艺复杂;NO常压熏蒸存在气体渗透效率低、处理时间长等问题。近年来,复合保鲜技术显示出显著优势,如减压处理(HYT)可提高1-甲基环丙烯(1-MCP)在苹果、梨和番茄中的渗透效率,缩短处理时间,有效保持果实品质。基于HYT在提升气体处理效率方面的优势,将其与NO熏蒸结合,有望克服单一NO熏蒸的不足,为杏采后保鲜技术提供新策略。因此,探究HYT+NO在维持小白杏采后品质的作用机制,尤其是对PAs与GSH代谢协同作用的调控机制,对于揭示HYT+NO延缓小白杏采后衰老的作用具有重要意义。

因此,新疆大学智慧农业学院(研究院)的刘永丽和新疆维吾尔自治区农业科学院农产品加工研究所的吴斌*、杨洋*等以‘轮台’白杏为试材,采用NO减压熏蒸处理,分析评价以下几个方面:1)果实品质,包括硬度、质量损失率与腐烂率,以及总抗氧化能力;2)GSH代谢关键代谢物含量、相关酶活性及其对应基因表达水平;3)PAs合成与代谢过程中内源性PAs含量、相关酶活性及其对应基因表达变化。旨在从生理与分子层面阐明外源NO减压熏蒸对小白杏贮藏品质的调控机制,探究HYT+NO处理是否通过协同调节PAs与GSH代谢,从而维持小白杏采后品质,为该技术的开发与应用提供理论依据。

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1 品质指标分析

随着贮藏时间的延长,小白杏果实表皮的颜色由绿转黄(图1A)。对照组果实在第6天开始转黄。至贮藏结束时,对照组果实出现腐烂现象并附着霉斑。HYT+NO、HYT和NO处理显著减缓了小白杏的转黄过程,NO减压熏蒸处理在第8天仅出现轻度转黄,相较于单减压和单熏蒸处理变化缓慢。如图1B所示,小白杏采后硬度在贮藏期间持续下降。第2天开始,对照组的硬度显著低于处理组(P<0.05),HYT+NO处理后的硬度最高。贮藏第10天时HYT+NO组分别比对照组、HYT组和NO组高163.92%、75.49%和85.43%(P<0.05)。4组质量损失率都呈增加的趋势(图1C)。在贮藏最后1 d时,3个处理组的质量损失率显著低于对照组,HYT+NO组处理效果最为显著(P<0.05)。贮藏后期杏果实腐烂加剧(图1D)。第10天,对照组杏果实的腐烂率达到了17.78%,HYT+NO、HYT和NO组的腐烂率比对照组分别低96.06%、84.59%、78.12%(P<0.05)。与对照组相比,HYT、NO、HYT+NO处理组都能维持果实贮藏品质,延缓衰老,HYT+NO处理组的效果最佳,故将HYT+NO处理组作为最佳处理组用于后续的实验分析。

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2 抗氧化能力和H2O2含量分析

对照组果实中T-AOC、DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率呈现整体下降趋势(图2A~C)。在整个贮藏期间,HYT+NO处理组的T-AOC、DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率始终极显著高于对照组(P<0.01)。HYT+NO处理组T-AOC至第6天达到峰值(图2A),此时,HYT+NO处理组的T-AOC是对照组的1.41倍(P<0.01)。贮藏末期(10 d),HYT+NO组的DPPH自由基清除率比对照组高12.89%(P<0.01)。第8天时,HYT+NO处理组ABTS阳离子自由基清除率是对照组的1.31倍(P<0.01)。贮藏期内对照组小白杏H2O2含量呈不断上升趋势(图2D),HYT+NO组H2O2含量始终显著低于对照组(P<0.05、P<0.01)。

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3 Put、Spd、Spm含量分析

整个贮藏期间,对照组Put含量均处于相对较高水平(图3A),HYT+NO处理组Put含量均极显著低于对照组(P<0.01)。贮藏最后1 d时,HYT+NO处理组果实Put的含量比对照组低65.23%(P<0.01)。两组Spd含量在贮藏期间呈先上升后下降趋势(图3B)。HYT+NO处理组Spd含量极显著高于对照组(P<0.01)。两组Spd含量均在第2天时达到高峰,HYT+NO处理组Spd含量比对照组高89.39%(P<0.01)。处理组Spm含量整体呈先上升后下降趋势(图3C),除第2天以外,HYT+NO处理组显著提升了Spm水平(P<0.05、P<0.01),贮藏第4天HYT+NO组Spm含量达到高峰,比对照组高45.09%(P<0.01)。

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4 PAs代谢关键酶活性分析

贮藏期间,果实中ADC和ODC活性整体呈先上升后下降趋势,均在第4天达到峰值,HYT+NO处理组ADC和ODC活性分别是对照组的1.18倍和1.12倍(P<0.01)。在整个贮藏期间,HYT+NO处理组ADC和ODC活性均极显著高于对照组(P<0.01)(图4A、B)。SPDS和SPMS活性变化趋势类似,呈先升高后降低趋势,HYT+NO处理显著提高了SPDS和SPMS活性。HYT+NO组的SPDS和SPMS活性均在第2天达到最大值,分别是对照组的1.71倍和1.29倍(P<0.01)(图4C、D)。HYT+NO处理组SAMDC的活性在第4天迅速升高(图4E),到贮藏结束均显著高于对照组,在第4天达到最大值,HYT+NO处理组是对照组的1.52倍(P<0.01)。HYT+NO处理抑制了DAO和PAO活性(P<0.05、P<0.01)(图4F、G),DAO活性整体呈现先上升后下降的趋势(图4F),对照组与HYT+NO处理组在第4天达到最大值之后迅速下降;HYT+NO处理的DAO活性比对照组低58.18%(P<0.01)。对照组PAO活性峰值与DAO活性峰值出现时间一致,HYT+NO处理组无显著高峰出现,始终处于相对较低的水平(P<0.01)。

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5 GSH、GSSG、T-GSH含量和GSH/GSSG比值分析

GSH和T-GSH含量整体变化趋势类似,在0~6 d呈上升趋势,然后持续下降(图5A、C),HYT+NO组小白杏的GSH和T-GSH含量显著高于对照组,均在第6天达到峰值,HYT+NO组分别是对照组的1.26、1.18倍(P<0.01)。GSSG呈整体上升趋势(图5B)。HYT+NO处理组的GSSG含量始终显著低于对照组,第10天时,HYT+NO处理组比对照组低24.38%(P<0.01)。HYT+NO处理的GSH/GSSG比值显著高于对照组(P<0.01)(图5D),表明HYT+NO处理可有效调节杏果贮藏期间的氧化还原状态。

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6 GSH代谢关键酶活性分析

γ-GCS、GR、GPX、GST的活性均呈现先升高后降低的趋势(图6)。HYT+NO处理的γ-GCS活性极显著高于对照组(P<0.01)(图6A),在第6天,HYT+NO处理的γ-GCS活性是对照组的2.05倍(P<0.01)。贮藏后期,HYT+NO处理组的GR和GPX活性极显著提升(P<0.01),分别在第8天和第6天达到峰值,HYT+NO处理组的GR和GPX活性峰值分别比对照组高68.42%和71.54%(P<0.01)(图6B、C)。除第8天外,HYT+NO处理组的GST活性显著高于对照组,两组GST活性在第4天达到峰值,HYT+NO处理是对照组的1.38倍(图6D)(P<0.01)。

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7 相关基因表达分析

PaGR、PaGPX、Paγ-GCS和PaGST基因在GSH代谢中起关键作用。HYT+NO组与对照组的Paγ-GCS的相对表达量呈先上升后下降趋势(图7A),除第2天外,HYT+NO处理组Paγ-GCS的相对表达量均显著高于对照组。HYT+NO处理显著提高了PaGR和PaGPX的基因表达水平(图7B、C)。HYT+NO组的PaGR基因表达水平整体呈升高趋势,显著高于对照组(图7B)。HYT+NO组PaGPX的表达水平在第4天出现峰值,是对照组的1.94倍(P<0.01)。HYT+NO处理显著增强了PaGST基因的表达水平(图7D)。在第6天HYT+NO处理组的PaGST表达水平是对照组的2.4倍(P<0.01)。

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HYT+NO处理显著增强了PaADC的基因表达水平,贮藏最后1 d时,HYT+NO处理组PaADC的表达水平比对照组高83.08%(P<0.01)(图7E)。HYT+NO处理组显著提高了PaSPDS和PaSPMS的表达水平(图7F、G)。HYT+NO处理组的PaSPDS表达水平在第2、4、6、10天分别是对照组的1.21、1.62、1.41、1.33倍(P<0.05)。HYT+NO处理组的PaSPMS表达水平在2、6、8、10 d时分别是对照组的1.11、1.26、1.29、1.20倍(P<0.05)。对照组和HYT+NO组PaSAMDC相对表达量差异显著(P<0.05、P<0.01),HYT+NO处理组的PaSAMDC表达水平在第2天出现峰值,是对照组的1.55倍(P<0.01)(图7H)。两组果实中的PaPAO相对表达量均整体先升高后降低(图7I)。HYT+NO处理组显著降低了PaPAO的相对表达量(P<0.05),在第4天达到高峰,HYT+NO处理组比对照组降低了38.97%(P<0.01)。

8 相关性分析

如图8所示,‘轮台’白杏硬度与DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率和T-AOC呈显著或极显著正相关(P<0.05、P<0.01),质量损失率和腐烂率与DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率和T-AOC呈显著或极显著负相关(P<0.05、P<0.01),抗氧化能力与果实品质紧密相关。DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率、T-AOC和GSH与Spd、Spm呈显著或极显著正相关(P<0.05、P<0.01)。

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本研究采用NO减压熏蒸处理小白杏,发现HYT+NO、HYT、NO处理均能有效保持硬度、抑制质量损失率和腐烂率的上升,延缓果实品质劣变,HYT+NO复合处理效果最显著(图1)。相关研究显示NO熏蒸能显著提升脐橙的采后贮藏品质,降低腐烂率。短时HYT能有效保持草莓的果实品质,延长6 d的贮藏期,与本研究的结果一致。本研究发现NO减压熏蒸对小白杏采后品质的维持效果显著优于单一处理方式。表明减压与NO熏蒸可能存在协同增效机制,能够克服单一NO熏蒸的技术局限。因此,NO减压熏蒸可能作为一种高效且绿色安全的保鲜技术手段,在鲜杏采后贮藏中展现出显著的保鲜效果和良好的应用前景。

GSH代谢是植物抗氧化防御系统的重要组成部分。GSH作为生物体内重要的抗氧化剂,在维持细胞氧化还原平衡中起着积极作用。该代谢调控主要涉及γ-GCS、GR、GPX和GST。其中γ-GCS是GSH生物合成通路的关键限速酶,它的活性水平直接影响GSH合成效率。在本研究中,HYT+NO显著提高了γ-GCS的活性。基因表达分析结果表明,HYT+NO处理后第4天,Paγ-GCS在小白杏中的表达水平迅速升高,且上调持续到贮藏结束,促进了GSH含量的升高。GPX可以催化GSH转化为GSSG,这一过程可将有害的过氧化物还原为无害的醇类,从而保护细胞结构和功能。GR则催化GSSG还原为GSH,以维持细胞GSH库容和防御能力。而GSH与GSSG转化速率反映了果实体内的氧化还原状态,当GSH/GSSG比值降低时,意味着细胞处于氧化应激状态。在本研究中,HYT+NO处理通过提高GPX和GR活性和增强相关基因表达,促进GSH-GSSG的循环,维持了较高的GSH/GSSG比值,显著提高小白杏的抗氧化能力。相关研究也发现NO熏蒸通过提高GR和GPX的活性增强了鲜杏的抗氧化能力。GST通过催化GSH依赖的过氧化物酶反应,清除有毒的有机过氧化物,保护细胞成分免受氧化损伤。本研究中,HYT+NO处理显著提升了GST活性,且PaGST基因在贮藏初期表达上调,表明GST在处理后被迅速激活增强抗氧化防御。这与茉莉酸通过上调GST基因减弱番茄氧化应激的结果一致。T-AOC和DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率是综合评估果实抗氧化状态的核心指标。H2O2的快速积累会打破细胞内氧化还原平衡,扰乱正常生理代谢,加速果实衰老进程。随着贮藏时间的延长,对照组杏果实的抗氧化能力逐渐下降,H2O2含量迅速上升,而HYT+NO处理的T-AOC和DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率在贮藏过程中却有所提升,H2O2含量也显著降低。抗氧化能力的增强有助于维持果实的采后品质。因此,进一步验证了HYT+NO通过促进GSH合成、循环和利用可有效提升抗氧化能力,可能对果实贮藏品质的维持具有关键作用。

PAs能够调节植物的生长发育,参与植物对胁迫的响应。先前研究表明,外源PAs处理可有效延长果蔬保质期,保持易腐农产品的品质。ADC、ODC、SPDS、SPMS是PAs代谢的关键限速酶,其中ADC和ODC催化生成Put。SPDS催化Put向Spd转化,而SPMS则进一步催化Spd生成Spm。SAMDC催化从蛋氨酸产生脱羧的S-腺苷甲硫氨酸,为Spd和Spm的合成提供丙胺基供体,是Spd生物合成的另一个关键酶。DAO和PAO介导PAs的降解催化过程,PAs降解过程中产生的H2O2等氧化产物会加剧果实的氧化应激反应。在本研究中,HYT+NO处理使ADC和ODC活性升高和基因表达水平增强,却显著降低了Put含量,这表明尽管Put的合成有所增加,但其被快速且高效地用于合成Spd,进一步转化为Spm。SPDS和SPMS活性同样显著升高,相应地Spd和Spm含量也显著增加(图3),基因表达水平的增强也验证了这一趋势(图7)。这与钙处理诱导的Put减少有助于Put转化为Spd维持品质和外源性24-表油菜素内酯通过降低Put浓度促进其向Spd和Spm转化的研究结果一致。本研究还发现,SAMDC活性升高和基因表达的增加可能也是HYT+NO处理后Spd水平升高的关键影响因素之一。研究表明,过表达SAMDC基因可增强Put向Spd的转化。HYT+NO处理显著抑制了PAs降解酶DAO和PAO的活性,进一步减少了Spd和Spm的分解消耗,有助于维持其贮藏期间的高水平。

值得关注的是,植物PAs与GSH代谢可能存在密切的功能协同关系。它们可通过调节氧化还原稳态、抗氧化系统和信号传导途径,共同增强植物对非生物胁迫的耐受性。先前的研究已表明,DAO和PAO活性的增强会加速白三叶草中Spd的降解,导致内源Spd含量下降,降低GSH含量并抑制相关抗氧化酶活性,削弱植物的抗氧化能力,加剧干旱胁迫。同时,Spd处理通过调节GSH/GSSG比值、维持氧化还原平衡,增强抗氧化能力,从而提高番茄幼苗的高温耐性。Ba Liangjie等发现外源PAs处理通过提升GR活性,维持了GSH水平,从而减少火龙果中活性氧的积累。有研究发现,增加GSH含量可维持氧化还原稳态,继而增强杏果实对链格孢菌的抗性、。相关研究还发现Spd处理后GST和GPX活性升高,减少了热胁迫水稻幼苗的氧化损伤。这表明PAs和GSH之间可能存在协同关系,共同调节果实的氧化还原状态,从而增强抗氧化能力。在本研究中,相关性分析也表明HYT+NO处理下小白杏Spd、Spm和GSH与T-AOC和硬度呈显著正相关,与质量损失率和腐烂率呈负相关,且Spd、Spm与GSH、GSH/GSSG呈显著正相关(图8)。因此,推测HYT+NO处理可以提高Spd和Spm水平、调节GSH代谢,从而增强果实抗氧化能力,最终维持小白杏采后品质。

结 论

本研究结果表明,HYT+NO通过上调PAs和GSH代谢相关编码基因的表达,提高ADC、ODC、SPDS、SPMS、SAMDC、γ-GCS、GR、GPX和GST的活性,促进Spd、Spm和GSH的积累,从而提高DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率和T-AOC,有效延缓果实硬度下降以及质量损失率和腐烂率上升,维持果实采后贮藏品质。HYT+NO通过降低DAO、PAO的活性,抑制PAs的降解和H2O2的积累,进一步维持PAs水平和提高保鲜效果。综上,HYT+NO处理通过调节PAs代谢和GSH代谢协同增强抗氧化能力,从而维持了小白杏贮藏品质,本研究可为HYT+NO保鲜技术在小白杏采后贮藏保鲜中的应用提供理论依据。

引文格式:

刘永丽, 张昱, 冯雨蝶, 等. 一氧化氮减压熏蒸对小白杏采后品质和多胺与谷胱甘肽代谢的影响[J]. 食品科学, 2026, 47(6): 304-316. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20250926-212.

LIU Yongli, ZHANG Yu, FENG Yudie, et al. Effect of nitric oxide fumigation combined with hypobaric treatment on the postharvest quality and metabolism of polyamines and glutathione in Xiaobai apricots[J]. Food Science, 2026, 47(6): 304-316. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20250926-212.

实习编辑:林安琪;责任编辑:张睿梅。点击下方阅读原文即可查看全文。图片来源于文章原文及摄图网

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