南京博研生物的大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒进行实验的步骤如下:
- 试剂和样本准备:在实验前30分钟将试剂盒、待测样本放置于室温下,确保所有试剂和样本达到室温。
- 试剂配制:根据说明书配制好试剂盒各种组分的工作液,包括稀释洗涤液和酶标抗体工作液。
- 标准品稀释:将冻干标准品用标准品/样本稀释液进行稀释,形成一系列浓度的标准品,用于构建标准曲线。
- 加样:在酶标包被板上准确加入不同浓度的标准品和待测样本,每个孔加入50μL。
- 温育:用封板膜封板后,37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。
- 洗涤:弃去液体,每孔加满洗涤液洗板,重复5次,确保彻底移除残留液体。
- 加底物显色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15分钟。
- 终止反应:每孔加入终止液50μL,使颜色由蓝色变为黄色。
- 检测读数:在15分钟内,使用450nm酶标仪进行检测读数。
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