现今社会节奏的不断加快,高负荷的脑力与体力劳动者易出现疲劳症状,致使工作效率降低乃至威胁身心健康,研究表明通过适当补充抗疲劳外源活性物质,是一种方便、灵活的延缓疲劳手段。目前已发现大量具有抗疲劳活性的物质,诸如多糖、多肽、植物多酚等,它们在具备抗氧化活性的同时还兼具抗疲劳作用,因而不断有学者根据疲劳产生的“自由基理论”尝试建立抗氧化能力与抗疲劳作用之间的联系,为抗疲劳功能产品的开发提供依据。牛磺酸作为功能性饮品的常见配料,已被大量研究证实能通过提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、降低肝组织丙二醛(MDA)含量,减轻活性氧自由基对机体产生的氧化损伤,从而达到缓解疲劳的功效。
黑龙江八一农垦大学体育教研部的白海军和黑龙江八一农垦大学食品学院的李志江*拟选取商业水解蛋白以及牛磺酸单体复配牛磺酸-水解大豆蛋白(TSPC),通过体外抗氧化实验对配方进行初期筛分,并通过大鼠运动性疲劳模型以及相关血液生化指标进行验证,从而更好地为抗疲劳补充剂协同作用的后续实验研究提供理论依据,以期为抗疲劳类产品的制备及活性评价提供思路。
1、不同配比对TSPC体外抗氧化活性的影响
如图1所示,5 种配比的TSPC均具有DPPH自由基清除能力,并与牛磺酸在溶液中所占的比例呈正相关,SPI的DPPH自由基清除能力相对较低。当牛磺酸与HSP质量浓度比为1∶10时,复合体系对DPPH自由基的清除能力最大(75.8%)。
超氧阴离子自由基具有极强的生物毒性,清除超氧阴离子自由基的能力可用来判断被测物的抗氧化能力,在本实验中邻苯三酚自氧化形成的超氧阴离子自由基有色产物的浓度与320 nm波长处的吸光度呈线性关系。如图2所示,当牛磺酸与HSP质量浓度比低于1∶20时,超氧阴离子自由基清除率随HSP比例增加呈上升趋势;当质量浓度比超过1∶20后呈平稳趋势,质量浓度比达到1∶20时超氧阴离子自由基清除率最大,达到71.4%。
如图3所示,SPI与水解SPI的抗脂质过氧化能力相对较弱,随着牛磺酸与HSP质量浓度比增加,TBARS值逐渐降低,质量浓度比低于1∶30时TBARS值与对照HSP组无显著差异(P>0.05),当质量浓度比超过1∶30后TBARS值显著降低(P<0.05),质量浓度比达到1∶10时抗脂质过氧化能力最强。
根据上述体外抗氧化指标的综合分析,最终选取1∶10(A组)、1∶20(B组)、1∶30(C组)3 种质量浓度比对TSPC进行动物实验,从耐力跑台以及体内生化指标共同探究TSPC抗氧化活性与抗疲劳功能的关系。
2、TSPC抗疲劳实验结果
大鼠力竭跑台运动时间
实验结果见表1,与对照组相比,模型组的运动时间显著缩短(P<0.05),说明模型组出现了疲劳症状,经过15 d胃饲后,A、B、C组的运动时间与模型组相比具有统计学差异 (P<0.05),分别提升了61.2%、55.8%、37.4%,A组运动时间最长,C组运动时间最短,但A、B两组间无显著性差异(P>0.05)。
大鼠血清LA、BUN浓度
实验结果见表1。经各剂量组饲喂后,与模型组相比,C、B、A组使大鼠体内LA浓度分别降低了4.07%、7.94%、15.39%,C组与模型组相比不能使LA浓度显著降低,A、B组能够显著降低LA浓度 (P<0.05),且A组降低LA浓度的能力最佳,但仍与对照组具有差异。模型组的BUN浓度与对照组相比具有显著差异(P<0.05),与模型组相比剂量组均能显著降低BUN浓度(P<0.05),A组效果最佳,降低了20.79%,
综上,表明TSPC能够一定程度上通过减少LA积累、降低BUN浓度,达到相应的缓解疲劳作用。
大鼠体内抗氧化活性
由表2可知,模型组中SOD的活力显著低于对照组(P<0.05),C组未能对SOD的活力产生显著影响(P>0.05),A、B组的SOD活力与模型组相比差异显著(P<0.05),分别提高了30.23%、22.76%。
由表2可知,模型组中GSH-Px的活力显著低于对照组(P<0.05),与模型组相比,3 组TSPC均能够显著提高GSH-Px活力(P<0.05),B、C两组间GSH-Px活力无显著性差异(P>0.05),A、B两组与对照组相比GSH-Px活力无显著差异(P>0.05),说明A、B两组均能使大鼠机体内GSH-Px活力达到正常水平,与模型组相比,A组的提高效果最为明显,约提高了17.97%。由表2可知,CAT活力在运动性疲劳造模后显著降低(P<0.05), C组的TSPC可使CAT活力恢复至对照组水平,且A、B组能将CAT活力显著高于对照组(P<0.05)。
当体内MDA浓度超过机体代谢能力时,自由基便会诱导不饱和脂肪酸形成脂质过氧化物,并导致细胞与组织的氧化损伤,因此MDA浓度也是一种用以评估由自由基导致体内脂质过氧化程度的有效指标。由表2可知,模型组大鼠血清中MDA浓度显著高于对照组 (P<0.05),在饲喂TSPC后,A、B、C组均能够使大鼠血清中MDA的浓度显著低于模型组。
3、TSPC抗氧化活性与抗疲劳能力的相关性
如图4所示,通过线性回归方程拟合计算,体内抗氧化活性与抗疲劳能力决定系数R 2 为0.8205,显著水平经F检验为0.01,证明在该运动模型下大鼠的抗氧化活性与抗疲劳能力呈正相关。
结 论
本实验采用了体外抗氧化实验对牛磺酸与HSP的质量浓度比进行了筛选,根据实验结果最终选取了1∶10、1∶20、1∶303 种比例进行动物实验,通过运动性疲劳大鼠实验模型发现各组均表现出一定的体内抗氧化活性,可提高SOD、GSH-Px、CAT活力,降低MDA浓度,从而减轻过氧化损伤程度,并通过LA、BUN浓度降低以及运动时间延长的结果验证了TSPC具有一定的抗疲劳能力,其中质量浓度比为1∶10时效果最佳。最后通过计算体内抗氧化活性与抗疲劳能力相关性,确立了TSPC体内抗氧化活性在本实验中运动性疲劳模型下与抗疲劳能力正相关,表明可以根据体外抗氧化实验对抗疲劳产品的配比进行初筛,从而为进一步开发以水解蛋白和牛磺酸为基础原料的复合功能抗疲劳产品提供了理论依据。
本文《牛磺酸-水解大豆蛋白复合体系对运动性疲劳大鼠的影响》来源于《食品科学》2021年42卷9期145-150页,作者:白海军,李志江。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20200501-003。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。
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修改/编辑:袁艺;责任编辑:张睿梅
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