JCI | 王晓雯/白凡/王文彦团队揭示CARD9缺陷驱动TREM2high巨噬细胞诱导T细胞耗竭的真菌感染新机制|免疫性疾病|巨噬细胞|抗体|活性|白凡|真菌感染

胱天蛋白酶募集域蛋白9（ caspase recruitment domain–containing protein 9 ，CARD9）是介导真菌模式识别受体信号向胞内转导的关键衔接蛋白。 CARD9 缺陷是一种常染色体隐性遗传的原发性免疫缺陷病，可导致严重甚至危及生命的真菌感染。其中， CARD9 缺陷相关的暗色真菌感染临床上顽固难治、预后不良，给临床诊疗带来极大挑战，但其免疫病理机制仍未完全阐明。

近日，北京大学第一医院王晓雯团队联合北京大学生物医学前沿创新中心白凡团队、清华大学基础医学院王文彦团队，在 The Journal of Clinical Investigation 发表题为

CARD9-dependent macrophage plasticity regulates effective fungal clearance

的研究论文。该研究通过单细胞转录组测序解析了 CARD9 缺陷患者及小鼠暗色丝孢霉病感染皮损的免疫图谱，发现 CARD9 缺陷显著促进 TREM2 high 巨噬细胞的分化，削弱其抗真菌功能，并加重 T 细胞的耗竭样改变，削弱宿主天然与适应性抗真菌免疫。进一步研究表明，靶向 TREM2 可部分逆转上述免疫异常，延缓疾病病程，为 CARD9 缺陷相关真菌感染的辅助免疫治疗提供了新的潜在思路。

研究团队以疣状瓶霉为代表菌株，在 WT 与 Card9 KO 小鼠足垫建立暗色真菌皮下感染模型，发现 Card9 缺陷小鼠对感染的易感性显著升高。结合感染局部的单细胞转录组分析显示，巨噬细胞是皮损中 CARD9 表达最为丰富的免疫细胞群，提示其在疾病发生发展中可能发挥关键作用，并成为本研究进一步深入分析的核心。

进一步研究证实， TREM2 high 巨噬细胞亚群在 Card9 缺陷小鼠及患者暗色真菌感染皮损中均显著富集。功能上，这类巨噬细胞表现出杀真菌能力下降、活性氧（ ROS ）生成减少、促炎因子分泌减少，导致抗真菌天然免疫功能受损。同时， TREM2 high 巨噬细胞还能通过多条免疫抑制相关信号通路与 Th1 细胞形成紧密互作，促进 Th1 细胞出现 “ 耗竭样 ” 表型，从而进一步削弱抗真菌适应性免疫反应（图1）。

图 1 . Card9 缺陷小鼠中富集的 TREM2 high 巨噬细胞促进 Th 1 细胞耗竭

在分子机制层面，研究发现暗色真菌刺激下， CARD9 缺陷巨噬细胞中 NF-κB 信号通路活化受限，而 PI3K/AKT/GSK3β/CREB 通路活性显著增强，继而上调转录因子 C/EBPβ 的表达与活性。研究进一步证实 C/EBPβ 可直接结合 TREM2 启动子区域，促进 TREM2 转录，从而驱动巨噬细胞向抗炎表型偏移并影响其抗真菌功能。

在治疗探索方面，研究团队发现阻断 TREM2 的中和抗体可显著减少 Card9 缺陷小鼠中 TREM2 high 巨噬细胞的比例，并缓解 T 细胞耗竭状态，从而有效减轻疾病进程并降低局部真菌负荷。此外，体外利用 siRNA 敲低巨噬细胞 TREM2 表达，同样可增强 Card9 缺陷巨噬细胞的暗色真菌杀伤能力及 ROS 生成，进一步支持 TREM2 作为潜在治疗靶点的可行性（图2）。

图 2 . 阻断 TREM2 的中和抗体显著改善 Card9 缺陷小鼠疾病进程

综上，本研究系统阐明了 CARD9 通过调控巨噬细胞可塑性影响抗真菌免疫的关键机制，揭示了 TREM2 high 巨噬细胞在 CARD9 缺陷相关暗色真菌感染中的病理作用及其作为靶点的潜在治疗价值。该研究不仅加深了对 CARD9 缺陷免疫病理机制的理解，也为未来靶向免疫调控的治疗策略提供了新的理论依据，拓展了免疫治疗在感染性疾病的应用。

北京大学第一医院皮肤科王晓雯教授，北京大学生物医学前沿创新中心白凡教授及清华大学基础医学院王文彦助理研究员为本研究的共同通讯作者。北京大学第一医院皮肤科张璐，北京大学生物医学前沿创新中心唐志淳，北京大学第一医院皮肤科张逸和刘文杰为本研究的共同第一作者。本研究得到了北京大学第一医院皮肤科李若瑜教授和清华大学基础医学院傅阳心教授的重要支持。清华大学基础医学院蒋海涛和余莉，北京大学第一医院皮肤科雷可歆和马玉帛为本研究提供了重要帮助。

原文链接：https://www.jci.org/articles/view/188827

制版人：十一

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（*排名不分先后）