Sci Adv丨栗占国、孙晓麟、初明、王庆文、金庆平联合揭示难治性类风湿关节炎治疗新靶点|孙晓麟|栗占国|治疗|炎症|王庆文|类风湿|金庆平|难治性|风湿关节炎

尽管类风湿关节炎（RA）是目前拥有最多靶向药物的风湿免疫病，但仍有大量患者属于对多种不同机制靶向治疗响应不佳的难治性RA。针对难治性RA的新型治疗靶点和药物仍缺乏。

近日，北京大学人民医院风湿免疫科栗占国教授、孙晓麟研究员联合北京大学基础医学院初明教授、北京大学深圳医院王庆文教授和浙江金华康恩贝制药金庆平研究员，作为共同通讯作者，在Science Advances合作发表题为P2X7R of synovial fibroblasts is a potential therapeutic target associated with refractory rheumatoid arthritis的研究论文，首次揭示了P2X7R在难治性RA患者滑膜成纤维细胞的异常表达模式，及其与难治性RA关键致病通路的联系。

该研究在分子互作、临床样本原代细胞功能实验、非人灵长类关节炎模型、人源化RA滑膜-软骨共移植模型中证实了人源选择性P2X7R特异性小分子抑制剂EVT-401可显著抑制滑膜成纤维细胞异常活化、减轻关节炎症与破坏，证明P2X7R是难治性RA的潜在治疗靶点，为突破多药耐药RA患者的治疗困境提供了新方向。

基于临床队列与单细胞转录组分析，本研究首先对“寡免疫型难治性RA”致病机制进行了探索：这类患者滑膜中免疫细胞浸润少，却以成纤维细胞异常增生为主要特征，其滑膜成纤维细胞中P2X7R的表达水平较骨关节炎对照升高3-5倍，且表达量与滑膜炎严重程度、DAS28疾病活动度等显著正相关。

通过单细胞转录组分析，发现P2X7R富集于两类与RA耐药高度相关的成纤维细胞亚群——（1）衬里层PRG4+CLIC5+亚群，负责介导血管翳形成和软骨破坏；（2）衬里下层DKK3+、NOTCH3+等亚群是RA多药耐药高风险CTAP-F亚型滑膜组织的核心标志细胞。P2X7R高表达患者对3种以上药物治疗无应答的风险显著高于低表达患者，成为难治性RA的分子病理特征。

现有RA靶向药物主要针对免疫细胞分泌的促炎因子或其介导的下游通路，对成纤维细胞自主激活的Notch通路作用不佳。本研究发现，通过抑制P2X7R，不仅可诱导RA滑膜成纤维细胞凋亡并引发G1期周期阻滞、有效抑制其异常增殖，还能显著下调 IL-6、MMP-3、DKK-1 等关键炎症因子与软骨破坏介质的释放；同时显著抑制细胞的迁移与侵袭能力，从而阻断血管翳形成、关节侵蚀与破坏的关键病理进程。

针对这一新型靶点，研究人员验证了国产人源P2X7R高选择性小分子抑制剂EVT-401的成药性，其对人源P2X7R的抑制IC50仅为10nM，选择性是大鼠同源受体的22倍，对P2X1/2/3/4R等多种同源受体无交叉抑制，脱靶风险极低。RNA测序分析显示，EVT-401显著下调细胞周期、炎症反应、ECM受体互作、Notch信号等与耐药RA相关的核心通路，可逆转滑膜成纤维细胞的致病表型。

鉴于啮齿类P2X7R与人差异大，团队使用食蟹猴胶原诱导关节炎模型，EVT-401显著降低临床关节炎评分、PIP关节肿胀率；影像学与组织病理分析显示骨侵蚀、软骨破坏、滑膜增生、炎细胞浸润均显著减轻；对心、肝、脾、肺、肾无明显病理损伤，安全性良好。通过进一步构建人源化RA滑膜-软骨共移植模型，证明EVT-401可显著抑制人RA滑膜成纤维细胞向软骨侵袭，并降低hP2X7R阳性细胞面积，提示了药物对RA患者靶细胞的体内疗效。

此外，该研究为既往P2X7R靶向药物临床试验失败的可能原因提供了解释：早期拮抗剂的人源选择性不足，未专门针对P2X7R高表达的患者进行分层研究。

图. EVT-401在人源化模型中抑制RA成纤维细胞侵蚀软骨。

综上所述，本研究首次系统证实P2X7R是难治性类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的潜在治疗靶点；高选择性P2X7R小分子抑制剂EVT-401可阻断增殖、侵袭、炎症，并在非人灵长类和人源化RA疾病模型中显示了良好的疗效与安全性；P2X7R可作为生物标志物筛选最可能获益的难治性RA患者。