小胶质细胞是大脑里重要的免疫细胞，是脑部疾病研究的重点对象。但目前常用的基因标记技术不够精准，除了标记大脑的小胶质细胞，还会顺带标记身体外周的巨噬细胞，两种细胞信号混在一起，很难分清各自的作用，实验结果容易出错。
基于此，2026年5月31日，弗吉尼亚大学Tajie H. Harris研究团队在《Cell Reports》杂志发表了“Enhancing the specificity of microglia genetic targeting using a CSF1R inhibitor”揭示了利用CSF1R抑制剂提高小胶质细胞基因靶向的特异性。
本研究证实，神经领域广泛使用的Cx3cr1CreERT2小鼠，其基因靶向作用同样会波及多种外周组织巨噬细胞；即便按照常规方案等待4周以提升靶向特异性，这类外周巨噬细胞也不会发生更新更替。为解决这一问题，本研究对Cx3cr1CreERT2小鼠联合使用他莫昔芬诱导与PLX5622处理，以此加快外周巨噬细胞的更新速度。在脑部感染模型中，该方案有效提升了Cx3cr1CreERT2小鼠小胶质细胞基因敲除的特异性，同时排除了外周巨噬细胞带来的实验干扰。综上，联合使用CSF1R抑制剂，可有效提升常规Cre品系小鼠用于小胶质细胞基因编辑的精准度。
图一 胱天蛋白酶-1助力大脑抵抗弓形虫感染
动物感染实验结果显示，胱天蛋白酶-1不调控中枢感染过程中的T细胞免疫应答，但可通过Cx3cr1阳性长寿命细胞，特异性促进中枢单核细胞浸润，助力机体清除弓形虫。
进一步研究证实，外周巨噬细胞中的胱天蛋白酶-1主要在感染急性期发挥防御作用。同时证实，传统四周间隔处理无法完全更新外周巨噬细胞，小鼠慢性感染出现的病原体清除缺陷，本质是感染急性期免疫防御不足导致的后续问题。
图二 外周巨噬细胞动态观察
研究发现Cx3cr1CreERT2可标记外周单核细胞和巨噬细胞，以往研究未结合小胶质细胞做长期动态观察。
本实验用小鼠模型配合药物处理，按更新快慢将各处巨噬细胞分为三类：肝脏巨噬细胞很难被标记，不同单核细胞的标记信号消退速度也不一样；药物能有效提升标记效果。其中小胶质细胞、脾脏等部位巨噬细胞更新最慢，肺部、淋巴结等速度中等，腹腔巨噬细胞和血液单核细胞更新最快，反复给药还会暂时改变部分细胞数量。用药后数周乃至数月，长寿巨噬细胞都很少更新替换。该标记体系会作用于多种外周长寿巨噬细胞，后续实验需考虑这一影响，并进一步优化标记的精准度。
图三 药物对巨噬细胞的作用效果分析
研究发现短期使用 CSF1R 拮抗剂，能提高细胞标记的精准度。本实验进一步探究该药物对脑部和全身巨噬细胞的影响：用药并恢复后，大脑皮层基因整体变化很小，仅少量免疫相关基因出现波动，说明巨噬细胞的清除与重建几乎不会干扰脑部基因活动。
实验选用药效更好的 PLX5622，用药恢复后，小胶质细胞数量基本不变。身体多数组织的巨噬细胞数量、表面分子表达也无明显异常，只有脑膜和腹腔的巨噬细胞发生改变，阳性细胞占比升高，证明这两处细胞出现了部分更新。更新后的细胞免疫功能依旧正常，也没有影响脾脏免疫细胞。
总的来说，这款药物对大脑影响微弱，主要改变脑膜、腹腔巨噬细胞的表面特征。另外，小鼠的性别、年龄和饲养环境，也会影响这类细胞的更新状态。
图四 全文摘要图
总结
本研究阐明胱天蛋白酶-1主要依靠外周长寿命巨噬细胞发挥抗弓形虫感染作用，纠正了此前认为小胶质细胞是功能主体的误区；同时建立了联合用药与基因标记的实验方案，可有效区分小胶质细胞和外周巨噬细胞的功能，也验证了相关细胞的生物学特征，为弓形虫感染及髓系细胞功能研究提供了可靠方法与理论参考。
文章来源
https://doi.org/10.1016/j.celrep.2026.117411
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