1. 百萤 Cell Meter PE Annexin V细胞凋亡检测试剂盒概述

Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒,膜联蛋白V可以与包括PE的荧光染料结合。该染料保留了其对磷脂酰丝氨酸(PS)的高亲和力,因此可用作流式细胞术分析正在经历细胞凋亡的细胞的敏感探针。由于PS的外化发生在细胞凋亡的早期阶段,PE膜联蛋白V染色可以比基于核变化(例如DNA片段化)的测定更早地鉴定细胞凋亡。 PE膜联蛋白V染色先于膜完整性的丧失,膜完整性伴随由凋亡或坏死过程导致的最新细胞死亡阶段。因此,用PE膜联蛋白V染色通常与碘化丙啶(PI)或7-氨基 - 放线菌素(7-AAD)等活体染料结合使用,使研究者能够鉴别早期凋亡细胞(7-AAD阴性,PE膜联蛋白V阳性)。具有完整膜的存活细胞排除7-AAD,而死亡和受损细胞的膜可透过7-AAD。例如,被认为存活的细胞既是PE膜联蛋白V也是7-AAD阴性的,而处于早期凋亡的细胞是PE膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性,而处于晚期凋亡或已经死亡的细胞都是PE膜联蛋白V和7-AAD阳性。该测定法不区分经历凋亡性死亡的细胞与因坏死性通路而死亡的细胞,因为在任一情况下,死亡细胞都将用PE膜联蛋白V和7-AAD染色。然而,当随着时间测量细胞凋亡时,可以经常从PE膜联蛋白V和7-AAD阴性(可行的,或不可测量的细胞凋亡)追踪细胞至PE膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性(早期凋亡,膜完整性存在),最后是PE膜联蛋白V和7-AAD阳性(末期凋亡和死亡)。细胞通过这三个阶段的运动表明细胞凋亡。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒。

2. 百萤 Cell Meter PE Annexin V细胞凋亡检测试剂盒适用仪器

流式细胞仪

E x: 488nm or 561nm

E m: 575/26nm

通道: PE通道

3.百萤 Cell Meter PE Annexin V细胞凋亡检测试剂盒数据分析

在活的非凋亡细胞中,RPE-模联蛋白V检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所以细胞的2-6%。在凋亡细胞中,RPE-模联蛋白V与磷脂丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外叶上,因此导致染色强度增加。

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图1.使用Cell MeterRPE-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测RPE-膜联蛋白V对Jurkat细胞中磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中在没有(蓝色)或1μM星形孢菌素(红色)的情况下处理4-5小时,然后用RPE-膜联蛋白V染色30分钟。 使用FACSCalibur(Becton Dickinson)流式细胞仪使用FL2通道测量RPE-膜联蛋白V的荧光强度。

4.参考文献

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